細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,與細(xì)胞核RNA,。2.方便快捷的離心柱操作方式,。3.提取的RNA,品質(zhì)高,,產(chǎn)量多,。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含RNA),。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,,包括RT-PCR,qRT-PCR,,RNA-Seq,,陣列等。6.細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR,。7.試劑盒可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,,而不是總RNA,。例如,在一些表達(dá)譜研究中,,較好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA,。或者,,在研究分析未剪接的RNA前體時(shí),,提取細(xì)胞核(Nuclear)RNA會(huì)是一個(gè)更好的選擇。然而,,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來(lái)提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,,不光費(fèi)用高昂,而且浪費(fèi)大量的材料與時(shí)間,。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,,簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)有效的方法,。tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者。長(zhǎng)沙RNA提取試劑單價(jià)
RNA提取真正需要注意的要點(diǎn):你的植物組織樣本采樣,、保存正常嗎,?組織裂解充分了嗎?組織起始量是否過(guò)大,?起始量過(guò)大的話,,他們得帶進(jìn)去多少RNase呀,導(dǎo)致裂解液不能充分壓制內(nèi)源性的RNase,,失敗就在預(yù)料之中,!你的細(xì)胞活性好嗎?細(xì)胞都到衰亡期了,,你提什么RNA呀,;細(xì)胞加的那么多,破壁不充分,,怎么裂解的好呢,,他們本身得帶進(jìn)去多少內(nèi)源性RNase污染呀!轉(zhuǎn)移液體時(shí)吸到沉淀了嗎,?吸水相時(shí)碰到中間層了嗎,?乙醇干燥凈了嗎?裂解樣本的過(guò)程是重中之重液氮研磨(手工):要先加液氮預(yù)冷一下研缽,,然后研磨,,研磨過(guò)程要保證研缽中一直有少量液氮,研磨完成一個(gè)樣本后,,直接加入裂解液渦旋震蕩后放常溫,,或者直接丟到液氮中,,全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨(研磨儀):研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷,,直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢,。在2ml圓底離心管(不需要無(wú)酶管,液氮研磨中不破裂就好)中加入5mm鋼珠一粒,,放進(jìn)樣品,,投入液氮中預(yù)冷。把所有預(yù)冷好的離心管**研磨模塊中,,放進(jìn)研磨機(jī)震蕩20-30秒,。完成后馬上加裂解液,渦旋,。RNA提取試劑銷售廠家總共可以使用該試劑盒進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)提取,。蘇州正規(guī)RNA提取試劑單價(jià)目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。
動(dòng)物細(xì)胞RNA提?。?,、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無(wú)菌PBS清洗1~2遍后,,再用適量PBS懸浮起來(lái),,然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬(wàn)不要完全棄掉液體后,,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,,這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,,降低RNA得率。2,、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,,把細(xì)胞吹下來(lái),,轉(zhuǎn)移到無(wú)RNA酶的EP管中,加裂解液進(jìn)行提取,。3,、貼壁細(xì)胞:需要先用胰酶消化,然后收集到無(wú)RNA酶的EP管中,,離心去其上清,,用PBS洗1~2次,去除多余的胰酶,以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟,。
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1,、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過(guò)程中導(dǎo)致的降級(jí),;應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取,,采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時(shí)置于液氮或者-80℃冰箱凍存,并減少反復(fù)凍融,。在RNA提取過(guò)程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭,、離心管及其他材料,提取過(guò)程盡可能的快,,提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時(shí)放于-80凍存,。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè),則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳,,電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的,。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,,洗滌液中含有乙醇,,在提取過(guò)程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒(méi)有充分晾干導(dǎo)致的,,殘留的鹽及有機(jī)溶劑對(duì)后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,,因此在提取過(guò)程中應(yīng)充分去除組織裂解液,洗滌時(shí)應(yīng)充分,,使管壁四周均能被洗滌到,另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟,,會(huì)進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留,。很多RNA也需要通過(guò)堿基配對(duì)原則形成一定的二級(jí)結(jié)構(gòu)乃至三級(jí)結(jié)構(gòu)來(lái)行使生物學(xué)功能。
RNA提取注意事項(xiàng):所有實(shí)驗(yàn)所用的泵頭,、離心管等消耗品均要使用RNase-free的,;整個(gè)過(guò)程要在無(wú)RNase污染的條件下進(jìn)行,通??梢栽跓o(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌,如有必要也可在實(shí)驗(yàn)前噴灑一些商用的RNase壓制劑,;所有相關(guān)溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無(wú)水乙醇與DEPC水配制),;溶液的配制使用移液器進(jìn)行操作,切勿使用量筒等中間器皿,;研缽,、研棒、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后,,200℃干熱滅菌4h,;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要戴手套和口罩;異丙醇,、氯仿,、乙醇等試劑要使用未開(kāi)封的,或者開(kāi)封之后直接分裝至小容量離心管的,,以避免多次使用的交叉污染,;拭子RNA提取試劑的選擇?產(chǎn)品價(jià)格,。南昌正規(guī)RNA提取試劑平均價(jià)格
植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有高效的DNaseⅠ,,可有效去除DNA污染。長(zhǎng)沙RNA提取試劑單價(jià)
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好,??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟,??焖伲?jiǎn)捷,,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成,。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,,可直接用于PCR,,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)長(zhǎng)沙RNA提取試劑單價(jià)
蘇州君欣生物科技有限公司辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,,為員工打造良好的辦公環(huán)境,。在蘇州君欣生物科技近多年發(fā)展歷史,,公司旗下現(xiàn)有品牌蘇州君欣生物等。我公司擁有強(qiáng)大的技術(shù)實(shí)力,,多年來(lái)一直專注于蘇州君欣生物科技有限公司的經(jīng)營(yíng)范圍包括原代細(xì)胞的定制以及相關(guān)產(chǎn)品的配套銷售與服務(wù),,干細(xì)胞染色體核型分析與鑒定、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基以及無(wú)血清細(xì)胞凍存等系列產(chǎn)品的生產(chǎn)與銷售,,動(dòng)物疾病模型的構(gòu)建以及藥物效果的驗(yàn)證等領(lǐng)域,。的發(fā)展和創(chuàng)新,打造高指標(biāo)產(chǎn)品和服務(wù),。蘇州君欣生物科技始終以質(zhì)量為發(fā)展,,把顧客的滿意作為公司發(fā)展的動(dòng)力,致力于為顧客帶來(lái)***的原代細(xì)胞,,無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,動(dòng)物疾病模型,。