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來源: 發(fā)布時間:2023-08-23

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,,具有杯狀形態(tài),、雙層膜結構,天然存在于血液,、尿液,、唾液、母乳和細胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細胞在內(nèi)幾乎所有類型的細胞(免疫細胞,、神經(jīng)細胞、干細胞),,都可以產(chǎn)生并釋放exosome,。Exosome內(nèi)含有與細胞來源相關的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,Exosome可通過細胞膜受體直接受體細胞,,也可運輸?shù)鞍踪|(zhì),、mRNA、miRNA,、lncRNA,、circRNA,甚至細胞器進入受體細胞,,參與細胞間通訊,。Exosome在免疫應答、炎癥反應、血管生成,、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關鍵作用,不同細胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,,可作為多種疾病的早期診斷標記物,,也能作為靶向藥物的載體進行疾病外泌體提取:高速離心以消除更大的囊泡,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

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外泌體的提取方法:1,、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質(zhì)進行分離的分析的方法,。樣品中大分子不能進入凝膠孔,,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來,;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出,。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設備,應用不普遍,。2,、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,,大于一般蛋白質(zhì),,利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體,。超濾離心法簡單高效,,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法,。長沙正規(guī)外泌體提取試劑哪里買外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:適用于多種物種,。

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為了分離外泌體,研究人員用兩個這樣的單元串聯(lián)構建了一個裝置,。首先,,使用聲波從血液樣品中除去細胞和血小板。一旦細胞和血小板被去除,,樣品進入第二個微流體單元,,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細胞外囊泡分開。這項工作的通訊作者之一,,麻省理工學院材料科學與工程系科學家MingDao博士說:“聲波更溫和,。而且在分離時,,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短,。這是一個很大的優(yōu)勢,。”使用該設備,,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘,。“這種新技術可以解決當前外泌體分離技術的缺點,,如周期長,,一致性差,產(chǎn)量低,,污染以及完整性受損等,。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡單?!毖芯咳藛T們說,。

外泌體可通過流式、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81),、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測,普遍應用于藥物載體,、疾病診斷marker,、精細醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小,,樣本含量低,提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等,。但到目前為止,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量,、純度以及生物活性,。外泌體是細胞間進行物質(zhì)運輸和信息交流的重要工具,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖,,血管新生和一些病癥轉移,。與細菌傳染,幫助細菌逃避免疫關系很大,,并與心血管疾病,,老年癡呆等疾病具有密切關系專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基來進行體外培養(yǎng),。

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外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞,、淋巴細胞,、樹突狀細胞、瘤細胞,、間充質(zhì)干細胞等,。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移,、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用,。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標志物,。細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:無需沉淀試劑,也無需過夜培養(yǎng),。深圳正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家

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外泌體與肺病預后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,,還有研究表明,,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),,NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),,進一步研究發(fā)現(xiàn)。正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

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