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石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點:1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好,??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題,。3、獨有的MRL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染,。4、多次漂洗去蛋白過程,,提取RNA純度更高,。RNA提取試劑注意事項:為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏,。徐州RNA提取試劑哪家好
RNA提取試劑注意事項:1,、必須戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品說話,以防RNA酶污染,。建議戴一次性口罩操作,。2、TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,,避免接觸皮膚或吸入,。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏,。如皮膚接觸TRIReagent,,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,,請聽取醫(yī)生意見,。3、TRIReagent抽提總RNA的同時,,理論上也可抽提蛋白和DNA,,但未經(jīng)測試。4,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。是基于異硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細胞和組織中提取總RNA的試劑,,在樣品裂解或勻漿過程中取出水相,,用異丙醇可沉淀回收RNA;中間層用乙醇沉淀可回收DNA,;有機相用異丙醇沉淀可回收蛋白,。深圳正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,,基本上各地均有現(xiàn)貨,。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒:無DNA污染,可直接反轉(zhuǎn)錄,,熒光定量,,不會出現(xiàn)洗脫液含絡合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應的情況,。本試劑盒提取的RNA可直接用于對前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實驗,,如轉(zhuǎn)錄組RNA測序,制作基因芯片,,熒光定量PCR,,核酸雜交,反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實驗,。一個樣十多分鐘搞定,!具有多糖多酚植物RNA提取試劑盒已普及到全國各大農(nóng)業(yè)大學,,農(nóng)科院,植物所等相關(guān)院校單位,,包括中國農(nóng)業(yè)大學,,中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術(shù)所,作物所,,蔬菜所,,多糖多酚植物RNA提取試劑盒由華越洋自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長,,根據(jù)多年來市場反饋不斷進行技術(shù)升級和改良得來,。具有操作步驟少,實驗快捷,,RNA產(chǎn)量純度高,,充分滿足后續(xù)實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點,。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等,。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實驗。
酵母RNA的提取方法:稀堿法是屬化學破壁法,,其方法是在一定堿濃度下,,使構(gòu)成細胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解,,從而破壞細胞壁,此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴格,,堿的濃度不可過濃,,應控制在1%,并且對提取溫度也有一定的要求,,提取時間短,。因為在過分劇烈的條件下,容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂,,使核糖核酸降解而影響收得率,。酵母菌作為重要的模式生物,是遺傳學和分子生物學的重要研究材料,。由于酵母菌的細胞壁成分復雜,,且較原核生物厚,難于破碎,,因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多,。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性,,是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題??俁NA的提取方法還有很多,,如Trizol法、異硫氰酸胍法,、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法,、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法,、熱硼酸鹽法等,,這些方法各有優(yōu)缺點,不同的方法適用于不同類型的材料,??偣部梢允褂迷撛噭┖羞M行50次標準提取。
RNA穩(wěn)定方法:1.在裂解緩沖液中立即溶解,,使RNase失活,。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield),,使核酸酶失活,,并在環(huán)境溫度下長時間保護核酸。這對正在實地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢,、全血等)的研究人員特別有幫助,。確保樣品完全溶解:在RNA提取過程中,較大限度地提高RNA產(chǎn)量和質(zhì)量的較佳方法是保證樣品的完全裂解,。然而,,并不是所有的樣本都對相同的裂解方案敏感。例如,,血細胞(如淋巴細胞,、PBMCs等)和微生物細胞往往更難以有效地溶解。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的,。為了提高裂解效果,,可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K,、溶菌酶等),。總RNA的產(chǎn)量可達30μg,。產(chǎn)量可能因樣品類型而異,。南京深圳RNA提取試劑
用于各種植物、動物,、微生物的RNA提取,,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書,。徐州RNA提取試劑哪家好
拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,,如果要提高核酸得率,,也可通過增加樣本量來實現(xiàn)。一般先取一根拭子的涮洗液樣本,,然后進行提取,,如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果,,應及時考慮更換試劑盒,。目前國內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q、Biog等,。根據(jù)我們的經(jīng)驗,,Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次)在0.5-3.5ug。同樣處理的口咽拭子,,Biog試劑盒的提取得率在1-4ug,,基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實驗的要求。徐州RNA提取試劑哪家好