鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉,。放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。鼠尾膠原服務(wù)電話
鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料,、試劑和儀器鼠尾、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液,、鈣液、磷液均購(gòu)自上海晶純生化科技股份有限公司,。日立高新TEMHT770(日本日立公司),;多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,,用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開,去掉皮毛,,并剪成小段,,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,,用無(wú)菌等滲氯化鈉溶液浸泡,。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,,按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液,。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,,4℃放置一周,,然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,,肌腱水解成膠凍狀凝膠,,置于冰箱4℃保存。唐山鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。
鼠尾膠原,,10mg包裝,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml,。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,,容量瓶配制比較準(zhǔn)確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,,吸十次不如加一次z準(zhǔn)確),加入盛膠原的瓶中,輕輕顛倒,,不要震蕩,,蛋白容易起泡。幾分鐘即可,,蛋白質(zhì)非常好溶解,。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大點(diǎn)的就行,。用*在瓶底加1ml氯仿,,打到一檔就行,避免加入氣泡,。然后4度過夜除菌,。4.第二天將上層膠原溶液分裝進(jìn)EP管中。用封口膜封口,,4度保存,,勿冷凍。
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴,,制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白,。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長(zhǎng)過程,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,,這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),,給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,,細(xì)胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。
蘇州君欣生物科技有限公司鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,,可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠,,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。不開玩笑的說,,本身高純度的鼠尾膠原蛋白是能吃的,。但是,實(shí)驗(yàn)室里制備出來(lái)的各種材料和原材料都不應(yīng)該被食用,,實(shí)驗(yàn)室也是禁食的,。這是傳說中的制作方法:面對(duì)大家都感興趣的知識(shí),智圈始終抱著嚴(yán)謹(jǐn)且專業(yè)的態(tài)度,,決心找出科學(xué)的制作方法,。膠原蛋白就像骨骼中的一張充滿小洞的網(wǎng),它會(huì)牢牢地留住就要流失的鈣質(zhì),。廈門正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹
I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分。鼠尾膠原服務(wù)電話
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。鼠尾膠原服務(wù)電話