目前的主流觀點認(rèn)為,，外泌體的產(chǎn)生過程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷,，形成內(nèi)體（endosome）,，再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB）,，較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類,、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,，并命名為exosome,。對于外泌體的作用，當(dāng)時推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式,。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle）,，所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì),。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞,、細(xì)胞分化、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中,。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離,。嚴(yán)重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應(yīng)用上的發(fā)展。南昌外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,，直徑約為30-200nm,，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu),，天然存在于血液、尿液,、唾液,、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,，也可運輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA,、miRNA,、lncRNA、circRNA,，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng),、血管生成、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用,，不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病,。miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子，它可以通過外泌體從一個地方轉(zhuǎn)運到另外一個地方行使基因沉默功能,。通過檢測外泌體中miRNA表達(dá)變化,，可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能。開封正規(guī)外泌體提取試劑報價外泌體提?。狠^常見的過濾膜具有0.8μm,、0.45μm或0.22μm的孔徑。

外泌體的提取方法,，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng),，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長狀態(tài)，不會被克制生長增殖,，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片,，用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,，過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),，進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,，這樣過濾除菌效率得到較大提高,，較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。該外泌體的提取方法，既結(jié)合了差速離心,，又結(jié)合了超濾和超速離心,，通過該提取流程，較終可高效地從人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)培養(yǎng)上清液中提取到高濃度,、高純度的外泌體,，具有操作簡單、成本低,，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點,。

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的菌類大小的顆粒。它們天然地存在于血液中,。根據(jù)來自美國德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,，對外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士,。在這項新的研究中,，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解,，增加它們的總存活率,。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活,。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,，這是因為這些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中。外泌體在免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時可獲得高純度和高回收率的外泌體——如新西蘭IZON開發(fā)的系列的外泌體排阻劑,。

外泌體的提取方法,，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長狀態(tài),，不會被克制生長增殖,，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理,、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片,，用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,，過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),，進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,，這樣過濾除菌效率得到較大提高,，較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體,。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍。廈門外泌體提取試劑哪家好

近年來,，隨著人們對外泌體的研究和認(rèn)識加深,。南昌外泌體提取試劑推薦廠家

在這項新的研究中，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解,，增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活,。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用，這是因為這些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中,。南昌外泌體提取試劑推薦廠家