人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞,、免疫細胞、血小板,、平滑肌細胞等。當(dāng)其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合，進而靶細胞細胞內(nèi)的信號通路,。二是在細胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合,，從而細胞內(nèi)的信號通路,。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA外泌體的提取分離：PEG-base沉淀法。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

近年來,，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等,。外泌體來源及內(nèi)含物,。幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體，同時外泌體也普遍存在于體液中,，包括血液,、眼淚、尿液,、唾液,、乳汁、腹水等,。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸（microRNA,、lncRNA、circRNA、mRNA,、tRNA等）,、蛋白、膽固醇等,。外泌體的表面marker主要有CD63,、CD81、CD9,、TSG101,、HSP27等。外泌體鑒定,。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法：透射電子顯微鏡（TEM）,、Nanosight、WesternBlot,、流式細胞術(shù),。無錫外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家將人尿液來源細胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾，以去除大的細胞殘片以及其它雜質(zhì),。

密度梯度離心法該方法由于比較繁瑣,，用的較少。原理是：像所有的脂質(zhì)小囊泡一樣,，外泌體可以懸浮于特定密度梯度的蔗糖中,，其密度范圍1.13g/ml-1.21g/ml，將要分離外泌體的樣本液體置于梯度蔗糖介質(zhì)上,，隨后通過離心將外泌體分離,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時,，對離心時間極為敏感。具體步驟是：收集培養(yǎng)2d的上清液,。將培養(yǎng)上清液先以1500r/min離心5min除去細胞及碎片,再依次以1000×g離心10min取上清,10000×g離心30min取上清,然后用100ku超濾離心管(Millipore)濃縮至15mL,

外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography,，SEC）是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子,。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據(jù)其直徑通過微球,，半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移,，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子,。此外,，可以將不同的洗脫溶液應(yīng)用于該方法,。與離心方法相比，色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,，這可能會改變囊泡的結(jié)構(gòu)。目前,，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術(shù),。不過，該方法耗時較長,，不適合大量樣本處理,。離心除去細胞器，留取上清,。

所有的細胞都能分泌外泌體,，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,，調(diào)控細胞生理活動。同時,，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外,，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些？lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,，包括circRNA,、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類等信息,。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人,、大鼠、小鼠,、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果,，涉及蛋白、mRNA,、miRNA,、脂類等信息,。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

外泌體提?。褐貜?fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

外泌體的提取,、分離方法：聚合物沉淀法,。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年,，將其作為一種新的方法來分離外泌體,。目前，市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,，該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器，但是價格昂貴,。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,，之后再低速離心。金華正規(guī)外泌體提取試劑直銷價