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來源: 發(fā)布時間:2024-05-17

染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),,是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶,。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,,因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中,。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法,、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高),。其中較為常用的是組織化學(xué)法操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng),。天津糖原染色試劑盒報價

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糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過碘酸酒清夜配法:過碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解天津糖原染色試劑盒報價亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥。

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糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白,、粘多糖,、糖脂、粘蛋白等),,過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內(nèi)多糖所在之處,。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,,氧化5min,;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,,侵染10-20min,;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min,;6.滴加蘇木素染色液,,染核1-2min;7.流水沖洗5min,;8.酸性乙醇分化液分化

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團或沒有氣味,則不能用,,配制時使用的容器,、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈,、無污染,。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],,配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復(fù)到室溫即可,。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),,冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),,環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,,室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),,使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,,室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間,。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞,、骨骼肌,、心肌等處。

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糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,晾干鏡檢,。細胞的組織化學(xué)方法,,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學(xué)反應(yīng),,從而在細胞局部形成有色沉淀物,,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進行定性,、定位、定量研究,。特殊染色方法及化學(xué)試劑的選擇,。天津糖原染色試劑盒報價

在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙。天津糖原染色試劑盒報價

糖原染色:1,、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,,糖原染色,。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,,紅色,定位于胞漿上,。3,、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,,如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等。天津糖原染色試劑盒報價