RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些實驗方案會推薦,,在異丙醇沉淀后,,用乙醇沉淀兩次。實際上,,任何提取實驗,,都會在純度和得率這一對矛盾中取舍。醇沉淀會將脂溶性雜質(zhì)去掉,,但部分非脂溶性的雜質(zhì)依然會連同RNA一起被沉淀下來,。因此,多整幾次,,并不會讓RNA的純度翻倍,,反而還會有降低得率的風(fēng)險。一般情況下,,異丙醇和乙醇各沉淀一次即可,。但是,倘若預(yù)計RNA濃度很低,,那就只能放棄純度,,在低溫沉淀數(shù)小時,以換來較高的得率,。圍繞DEPC的玄學(xué),。許多實驗方案會推薦使用0.1%DEPC處理RNA相關(guān)用水,以滅活RNase,。這一點是要肯定的,。不過,在使用DEPC的過程中,,又充斥著一些玄學(xué),。高壓滅菌后的DEPC水,,會有一股“香甜”的味道。許多人會以為那是殘留的DEPC而不敢用,。實際上,,這只是DEPC分解成CO2和乙醇后,,產(chǎn)生的一些揮發(fā)性酯類副產(chǎn)物。拭子RNA提取試劑的選擇,?操作簡便性,。上海正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,,彼此用氫鍵相連,,所以在甲醛變性膠中,,沒有28S帶出現(xiàn)。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測其在OD260的光吸收,。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量),。RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),,高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng),。唐山正規(guī)RNA提取試劑單價RNA提取試劑注意事項:溶液需用DEPC水配制,。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),,已成功用于葡萄,,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品,。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,,PCR壓制物清理劑,,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品,。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題,。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點:操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘,。RNA純度高,,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染,。適用于各種昆蟲組織,,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR,、Northern雜交,、cDNA合成等實驗。一站式,,提供RNase-free的樣品收集管,。
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。兼容性強,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,,也不需要乙醇沉淀等步驟??焖?,簡捷,單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成,。多次柱漂洗確保高純度,,OD260/OD280典型的比值達1.9以上,,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K,、溶菌酶等),。
在細胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,,RNA主要分三類,,即tRNA(轉(zhuǎn)運RNA),rRNA(核糖體RNA),,mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,,內(nèi)容按照細胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄,;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場所,。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,像是組成剪接體的snRNA,,負責(zé)rRNA成型的snoRNA,,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達,。而其他如I,、II型內(nèi)含子、RNaseP,、HDV,、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過程的活性,即具有酶的活性,,這類RNA被稱為核酶,。在病菌方面,很多病菌只以RNA作為其中的遺傳信息載體(有別于細胞生物普遍用雙鏈DNA作載體),。細菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR,。廣州RNA提取試劑直銷價
拭子RNA提取試劑的選擇,?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,提高核酸得率,,可通過增加樣本量來實現(xiàn),。上海正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
RNA提取:預(yù)備工作RNA酶(Rnase)是導(dǎo)致RNA降解較主要的物質(zhì),。此酶非常穩(wěn)定,,在一些極端的條件下只可暫時失活,,但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活,。1.它普遍存在于人的皮膚上,,因此制備RNA時必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器,。根據(jù)取液器制造商的要求對取液器進行處理,。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,可基本達到要求,。3.塑料制品,、玻璃和金屬物品的處理。上海正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹