石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡(jiǎn)介:改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好,??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過(guò)程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過(guò)度干燥不易溶解問(wèn)題,。3,、獨(dú)有的MRL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染。4,、多次漂洗去蛋白過(guò)程,,提取RNA純度更高RNA提取試劑注意事項(xiàng):盡量不要對(duì)著RNA樣品說(shuō)話,以防RNA酶污染,。蘇州RNA提取試劑哪家便宜
拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,,如果要提高核酸得率,,也可通過(guò)增加樣本量來(lái)實(shí)現(xiàn)。一般先取一根拭子的涮洗液樣本,,然后進(jìn)行提取,,如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣,。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果,,應(yīng)及時(shí)考慮更換試劑盒。目前國(guó)內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q,、Biog等,。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部來(lái)回刮擦10次)在0.5-3.5ug,。同樣處理的口咽拭子,,Biog試劑盒的提取得率在1-4ug,基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實(shí)驗(yàn)的要求杭州RNA提取試劑推薦廠家細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,,直接用于RT-PCR/qRT-PCR。
RNA提?。侯A(yù)備工作RNA酶(Rnase)是導(dǎo)致RNA降解較主要的物質(zhì),。此酶非常穩(wěn)定,在一些極端的條件下只可暫時(shí)失活,但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性,。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活,。1.它普遍存在于人的皮膚上,因此制備RNA時(shí)必須戴手套,。2.RNase的又一污染源是取液器,。根據(jù)取液器制造商的要求對(duì)取液器進(jìn)行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,,可基本達(dá)到要求,。3.塑料制品、玻璃和金屬物品的處理,。
RNA是核糖核酸,,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:紫外吸收:核酸的λm=260nm,,堿基展開(kāi)程度越大,,紫外吸收就越厲害。當(dāng)A=1時(shí),,DNA:50ug/ml,,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml,。用A260/A280還可來(lái)表示核酸的純度,。沉降速度:對(duì)于拓?fù)洚悩?gòu)體(核苷酸數(shù)目相同的核酸),其沉降速度從達(dá)到小依次為:RNA;超螺旋DNA>解鏈環(huán)狀DNA;松弛環(huán)狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA,,較下面是RNA,。電泳:核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳,,泳動(dòng)速度主要由分子大小來(lái)決定,,因此,電泳是測(cè)定核酸分子量的好方法,。DNA分子量測(cè)定較直接的方法:用適當(dāng)濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測(cè)出其長(zhǎng)度,,按B-DNA模型算出bp數(shù),,根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量??俁NA提取試劑:試劑中含有酚等有害物質(zhì),,注意個(gè)人防護(hù)。
常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動(dòng)物組織及動(dòng)物細(xì)胞總RNA提取較常用的方法,,異硫氰酸胍法操作簡(jiǎn)單快捷,,適用于樣本足夠大的常規(guī)動(dòng)物組織,;Trizol法裂解能力較強(qiáng),尤其適合小樣本及特別難提取的組織,,如兔子皮膚,,動(dòng)物結(jié)締組織等總RNA的提取,;另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑,,還可以用于植物組織、細(xì)菌,、菌類等組織的提取,。對(duì)于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉,、油菜等還可以使用CTAB法進(jìn)行總RNA的提取,。提取RNA時(shí)我們經(jīng)常遇到的問(wèn)題是:(1)RNA產(chǎn)量較低;(2)RNA有嚴(yán)重的鹽類污染,;(3)RNA有嚴(yán)重的有機(jī)溶劑污染,;(4)樣品降解等問(wèn)題。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有高效的DNaseⅠ,,可有效去除DNA污染,。石家莊RNA提取試劑價(jià)格
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):提取的RNA,品質(zhì)高,,產(chǎn)量多,。蘇州RNA提取試劑哪家便宜
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過(guò)程中去除干擾物的技術(shù),,已成功用于葡萄,,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品,。另外華越洋還開(kāi)發(fā)了糖類清理劑,,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,,樣品核酸穩(wěn)定劑,,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2,、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲(chóng)RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單快速,,處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘,。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲(chóng)中的多糖污染,。適用于各種昆蟲(chóng)組織,,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR,、Northern雜交、cDNA合成等實(shí)驗(yàn),。一站式,,提供RNase-free的樣品收集管。蘇州RNA提取試劑哪家便宜