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來源: 發(fā)布時間:2024-06-28

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定,。糖原易溶于水,,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗,。應避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,,如Carnoy液,,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側的現(xiàn)象,,多數(shù)人認為是由于固定劑把細胞內的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成,。其他組織應用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內固定與保存,,是針對糖的性質和避免糖原溶于水而采取的相應措施,。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,,亦能**白和糖原沉淀,,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內部。江蘇糖原染色試劑盒廠家供應

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糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,,一般可用3個月,,變黃則失效。山東品質好的糖原染色試劑盒平均價格素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,。

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PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞或Reed-Sternberg細胞,,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性或陰性反應,。②幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性反應,,且空泡中心為陰性反應,。③幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉移的腺細胞,后者呈強陽性反應,,陽性反應物質為紅色細顆粒狀或粗顆粒狀,,有時呈紅色塊狀。白細胞系統(tǒng):急性淋巴細胞白血病時白血病性原始淋巴細胞的陽性反應物質為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,,底色不紅,;急性粒細胞白血病時,白血病性原始粒細胞的陽性反應物質呈均勻分布的紅色細顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細胞白血病時,,白血病性原始單核細胞的陽性反應物質呈紅色細顆粒狀,,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大,。

糖原染色:細胞內含1,,2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基,與特殊染液作用,,使無色品紅變成紅色化合物,,沉淀于胞質之中。紅色的深淺與細胞中起反應的1,,2-乙二醇基的量呈正比,。用于不典型巨核細胞與李—斯細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,,后者為陰性或弱陽性,;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,,而后者反應為陰性或弱性,。正常值正常情況下,紅細胞系統(tǒng)的原,、幼紅細胞和成熟紅細胞,;粒細胞系統(tǒng)的原粒細胞、原單核細胞和大多數(shù)淋巴細胞為陰性反應,。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應,。糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診.。

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PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,,不主張應用唾液,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置,??梢赃x用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞,。湖南咨詢糖原染色試劑盒廠家供應

冷凍切片染色效果不佳,成熟時間2個月,染色時間一般15-20分鐘。江蘇糖原染色試劑盒廠家供應

注意事項:染色前:①切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,,切片不能太厚。②撈片時,,較好一張玻片撈一個組織,組織較好位于玻片的中間,,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,,達不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時,,一定要注意組織切片脫蠟務必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”,。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,,較終導致染色效果不佳,,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙,,以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒,,致使標簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳,。江蘇糖原染色試劑盒廠家供應