無(wú)血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液,。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,,**降低了細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷,。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無(wú)任何動(dòng)物源組分,,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),,確保細(xì)胞凍存安全,。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,,無(wú)需程序降溫,。無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存,。溫州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)
永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯,因此,,使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基,,效果也不錯(cuò)。典型的配方是在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,,或只是在血清中加入10%的DMSO,。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水,以防止冰晶形成,,刺穿細(xì)胞,。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹,DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮,而后在解凍時(shí)又變得腫脹,。血清,,這種富含營(yíng)養(yǎng)成分的物質(zhì),直接支持細(xì)胞,?!爱?dāng)細(xì)胞處于這種營(yíng)養(yǎng)豐富的環(huán)境時(shí),它們能夠更好地復(fù)蘇,。寧波正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)技術(shù),。
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中,。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù),。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,,置于離心管中,,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,,3~5min),。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml,。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液,。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中,。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存,。7.若研究者需要液氮保存時(shí),,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中,。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml),。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,,3~5min)。移去離心管中的上清液,。4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml,。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液,。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中,。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存,。7.若研究者需要液氮保存時(shí),,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,。
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,,內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰,。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰,,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,,隨著溫度的降低,,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,,在復(fù)溫時(shí),大量水分會(huì)因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),,造成細(xì)胞死亡,。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加,,凍存流程簡(jiǎn)化也成為必然趨勢(shì),,因此無(wú)血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。寧波正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,,無(wú)動(dòng)物源組分,。溫州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中,。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔,。1.開始之前,,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,,確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基,。2.在37°C水浴中快速解凍,,持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài),。3.水浴中取出凍存管,,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管,。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解,。溫州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)