網(wǎng)狀纖維的變化,,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,,對(duì)疾病的診斷有極大意義,。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密,、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),,尤其是在臨床病理診斷中,,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,,網(wǎng)狀纖維不易顯色,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置,。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱,。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),,血管周圍以及造血部位,,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。將動(dòng)物殺死后迅速取出所需要的組織,。山東糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體、霉菌,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等,。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟,。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液,。福建咨詢糖原染色試劑盒銷售廠家動(dòng)物材料取用時(shí)需對(duì)動(dòng)物施以麻醉,,常用的麻醉劑有氯仿和。
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中,。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一,。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,,再通過顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性,、定位、定量研究
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),,淋巴細(xì)胞積分值正常,。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),,積分值增高,;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),,故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì),。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng),;急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽(yáng)性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病時(shí),,原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,,避免浪費(fèi)試劑。
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色,。②在染色過程中,,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟,。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,,避免多余的水把染液稀釋了,,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑,。在染色時(shí),,用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出,。再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì),。北京品牌糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。山東糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒有氣味,,則不能用,配制時(shí)使用的容器,、藥勺,、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染,。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],,配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可,。沈洪武等通過對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),,冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),,環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),,使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間,。山東糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)