利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。方法通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,，并重構(gòu)成膠原纖維,。然后，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d,，通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化,；礦化6d后,，膠原纖維內(nèi)部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來(lái)的物質(zhì),。廣州鼠尾膠原推薦廠家

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：將尾巴從動(dòng)物身體切除后,，會(huì)冷凍起來(lái)，并提取尾巴里的筋腱,。然后,，將筋腱切成小塊，并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中,。用這種方法,，能將膠原蛋白從動(dòng)物材料中分離出來(lái)。在食品加工領(lǐng)域,，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。它還可以當(dāng)作酸奶，冰淇淋,，果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用,。在一些低脂肪食品中，它用于模仿全脂食品的感覺(jué)和質(zhì)地,。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,，據(jù)說(shuō)能讓手指甲和皮膚看起來(lái)更好。此外,，還有基于膠原蛋白的保健品,，可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。蕪湖南昌鼠尾膠原在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,，之前多從牛皮、豬皮,、牛腱中提取,，但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì)，也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,；同時(shí),，這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動(dòng)物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染，如果用此開(kāi)發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險(xiǎn)及危害,；再次,，人的真皮中主要含有I型和III型，但I(xiàn)II型不易大量獲得,，故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問(wèn)題的關(guān)鍵,，這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一,。同時(shí)，I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,，如機(jī)械性能,、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、弱抗原性,、可生物降解性和膠原的自締合性,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上，pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,，在成膠過(guò)程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來(lái)中和。需要的溶液（均需要無(wú)菌,、預(yù)冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用),，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解：在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說(shuō)明：含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。開(kāi)封正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦

建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。廣州鼠尾膠原推薦廠家

詳細(xì)步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min,；2.將尾巴剪開(kāi),、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右）,，抽出銀色的尾鍵,；3.把剪碎的尾鍵置于150ml，0.1％消過(guò)毒的醋酸中,，4℃放置,，并不時(shí)振蕩；4.48h后取上清,，4000轉(zhuǎn)離心30min后,，取上清；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存,。有時(shí)可繼續(xù)向4,。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重復(fù)以上步驟,，以制備更多的鼠尾膠,。在使用時(shí)，先將冰存的膠原液在室溫下解凍,，再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿：1）用吸管吸取膠原液,，在無(wú)菌的培養(yǎng)器皿的生長(zhǎng)面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2）若包被的是培養(yǎng)瓶,，可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻,。讓氨氣充入瓶?jī)?nèi)后，即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞,。若為培養(yǎng)皿或板的話,，可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi)，將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),，蓋緊飯盒蓋,，四周用封口膠封死。廣州鼠尾膠原推薦廠家