與DNA不同,,RNA一般為單鏈長分子,,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu),但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能,。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同,,不過除了A-U、G-C配對外,,G-U也可以配對,。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,,RNA主要分三類,,即tRNA(轉(zhuǎn)運(yùn)RNA),rRNA(核糖體RNA),,mRNA(信使RNA),。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄,;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場所,。總RNA的產(chǎn)量可達(dá)30μg,。產(chǎn)量可能因樣品類型而異,。唐山正規(guī)RNA提取試劑哪家好
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,,也不需要乙醇沉淀等步驟,。北京正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格馬鈴薯塊莖,蘋果,,西瓜果肉,,獼猴桃,梨,,月季等,,中快速提取總RNA,同時(shí)可以處理大量不同樣品,。
酵母RNA的提取方法:濃鹽法,。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁,其化學(xué)成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),,此外,,脂類8.5-13.5%,蛋白質(zhì)6-8%,,還含有幾丁質(zhì),,酵母菌的葡聚糖,分子是為240000道爾頓,,是一種分枝聚合物,,葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過磷酸二酯鍵與磷酸邊接,,所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細(xì)胞壁,。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多種方法,,而用高濃度鹽溶液處理,,同時(shí)加熱,以改變細(xì)胞的通透性,,就可以使核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來,。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達(dá)到提取之目的。其中食鹽起到自溶促進(jìn)劑,,以及防腐與脫臭的作用,。
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無論是人,、動物,、植物還是細(xì)菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果,。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品,,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,,故而能夠作RNA印跡分析,、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇,、體外翻譯,、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對照顯示,,公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,。
RNA提取試劑注意事項(xiàng):1、需自備氯仿,,異丙醇,,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),,和DEPC水,。2、所有離心管,,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染,。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,,然后滅菌,,烘干。溶液需用DEPC水配制,。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,,處理過夜,滅菌即成DEPC水,。3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些,。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品,。如果不能及時(shí)抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,,并裂解樣品后凍存,。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。昆明正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)
買點(diǎn)無酶的吸頭、離心管,,找一個(gè)普通的試驗(yàn)臺,,穿好實(shí)驗(yàn)服戴好手套,保護(hù)好自己就好,。唐山正規(guī)RNA提取試劑哪家好
總RNA提取試劑是一種快速從組織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑,。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì),。純化的總RNA可用于RT-PCR,、NorthernBlot、RNA酶保護(hù),、Poly(A)mRNA純化,、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。是一種快速從組織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑,。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性,;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,,隨后用異丙醇沉淀RNA,。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR,、NorthernBlot,、RNA酶保護(hù)、Poly(A)mRNA純化,、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)唐山正規(guī)RNA提取試劑哪家好