細胞凍存秘籍：細胞凍存對于大多數(shù)動物細胞,，通常每分鐘下降-1至-3℃,。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng),。如果沒有程序降溫系統(tǒng),，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜,。雖然這種方法適用于許多細胞系,，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的冷卻,，不建議用于珍貴細胞,。無論使用哪種冷卻方法，重要的是快速高效地將其傳輸?shù)捷^終存儲位置,。如果轉(zhuǎn)移不能立即完成,，可以將小瓶置于干冰上一段時間。這樣可以避免在轉(zhuǎn)移過程中發(fā)生溫度升高而損害細胞,。在這個轉(zhuǎn)移過程中溫度升高是解凍后影響細胞活力的主要原因,。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力。杭州正規(guī)無血清細胞凍存液推薦廠家

細胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項：1,、凍存液比例一般是培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1或5:4:1,；動物種屬的原代細胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基：血清：DMSO=0:9:1，即直接用血清重懸細胞再加入DMSO,，盡管如此,，原代細胞的復(fù)蘇成活率還是很低。2,、有文獻表明,，細胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙，因為這一速度可以很好的控制細胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生,。我們實際操作不可能將速度控制的這么精確,，目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min,、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中,。合肥無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細胞凍存液使用方法：按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。

無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的優(yōu)勢：簡單,、方便,、快捷。1.即用型,，無需現(xiàn)配,，可直接使用。2.可孔板原位凍存,，可微量凍存,，無需使用凍存管。3.無需程序降溫,，可直接放置-80℃凍存,，操作簡單。4.不含血清,，較大減少細胞污染,。5.因不含血清，批次間差異小,。6.無需液氮,，-80℃冰箱長期凍存。無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的方法：1.驗證陽性克隆的細胞培養(yǎng)孔,，將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,；2.加入適量Cellregen無血清細胞凍存液，充分浸潤細胞（無需消化細胞）,；3.蓋上蓋板,，直接放入-80℃冰箱,，長期冷凍保存,。

無血清快速細胞凍存液保存條件：儲存于4℃以下,。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期2年,。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,，盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,，推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法：選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率,。1,、按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2,、按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù),。3、取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,，置于離心管中,，離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃,，3~5min）,。移去離心管中的上清液。4,、加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,，制成細胞混合液,。5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中,。6,、直接將含細胞混合液的凍存管放入-70℃以下冰箱，長期冷凍保存,。7,、若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-70℃以下冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐,。無血清細胞凍存液,，含多種保護劑成分。

細胞凍存經(jīng)驗談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道：研究人員經(jīng)常需要冷凍細胞并保存,，以供后續(xù)實驗或臨床使用,?；具^程相當簡單：慢慢冷凍細胞，將凍存管放入液氮中,，并在需要時快速解凍,。凍存培養(yǎng)基能支持細胞并防止冰晶形成。不過,，Malfavon的體驗告訴我們,，使用不同的凍存培養(yǎng)基，結(jié)果那可是大不同,。一些經(jīng)驗老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基,。不過，那些面對脆弱細胞（比如原代和多能細胞）的研究人員,，則更喜歡購買標準化的商業(yè)產(chǎn)品,。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益，以避免細胞在解凍時凋亡,。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）,。南昌正規(guī)無血清細胞凍存液服務(wù)電話

無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合,。杭州正規(guī)無血清細胞凍存液推薦廠家

含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題：1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,，此步可省略)。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣,，耗時耗力。3.含血清,，細胞污染(細菌,、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存,。Cellregen無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,，含DMSO、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液,。Cellregen無血清細胞凍存液的凍存方法是：將細胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長期保存。杭州正規(guī)無血清細胞凍存液推薦廠家