所含化學成分明確,無動物源性成分,,可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,,保護細胞免受冰晶和溶質損傷,適用于大多數常規(guī)細胞,。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。產品優(yōu)點1,、省去繁瑣的降溫步驟,,可直接放置于-80°C冰箱,節(jié)省時間和精力,。2,、即用型,無需現(xiàn)配,,操作方便,,可減少實驗中因操作引起的污染。3,、在多種哺乳細胞系中經過性能驗證,,其復蘇率和活率達90%以上。無血清細胞凍存液:凍存細胞,,無需程序降溫,。寧波濟南無血清細胞凍存液
細胞凍存液是如何保護細胞的:當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,,產生冰晶損傷,。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷,。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,,從而降低冰點,減少冰晶的形成,,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在較低溫條件下保存,。在復蘇時,一般以很快的速度升溫,,1-2分鐘內即恢復到常溫,細胞內外不會重新形成較大的冰晶,,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產生,,凍存的細胞經復蘇后仍保持其正常的結構和功能。南京無血清細胞凍存液哪家好無血清細胞凍存液存儲條件:推薦將產品分裝成小管后,,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存,。
細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,,慢速冷凍可使細胞內的水份滲出細胞外,,減少細胞內形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結晶快速融化,,避免慢速融化水份滲入細胞內,,再次形成胞內冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復蘇細胞應采用快速融化的方法,,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷,。
細胞凍存液常見問題:1.從繁衍期到產生高密度的單層細胞之前的塑造體細胞都能夠用以凍存,,但較好是為多數成長期體細胞,。在凍存前一日較好是換一次細胞培養(yǎng)液;2.將凍存管放進液氮容器或從這當中取下時,要搞好安全防護工作中,,以防凍壞;3.凍存和再生較好用新配置的細胞培養(yǎng)液,。細胞凍存的基本原理:細胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與,,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時會集體不工作,,低溫貯藏的目的是通過較低溫使細胞代謝活動近乎停止。細胞因此進入休眠狀態(tài),,使細胞“不會老”,所以可以長期保存,。因為凍融過程對所有細胞和組織都是有一定傷害的,,因此,,需要開發(fā)出有效的技術來防止細胞死亡和損傷,。無血清凍存液用途:無血清細胞凍存液用于免疫細胞及干細胞的存儲,。
細胞凍存注意事項:1、細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。2,、復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,,細胞濃度過低,,不利于細胞的貼壁。3,、加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,,就會影響細胞生長,,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,,還有一個說法是1%,。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度,。無血清細胞凍存液使用方法:直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,,長期冷凍保存,。南京無血清細胞凍存液哪家好
血清批次,、品質間差異導致凍存液的批次間差異。寧波濟南無血清細胞凍存液
細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細胞的活力,。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,,從而使細胞產生內源性的機械損傷,,引起細胞內環(huán)境滲透壓,PH,,電解質等的改變,,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,,添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液.細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,,而且細胞一旦開始原代培養(yǎng),,它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要,。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,,理論上儲存時間是無限的,。寧波濟南無血清細胞凍存液