外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,，實現(xiàn)細胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運藥物而引起科學家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨特的優(yōu)勢,，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性,，可以穩(wěn)定存在于血液中,，納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,，使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑,。武漢正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體（exosome）是所有細胞釋放出的細菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中,。根據(jù)來自美國德州大學MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,，對外泌體進行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學系研究員RaghuKalluri博士,。在這項新的研究中,，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子，從而導致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率,。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來靶向胰腺病細胞中的KRAS突變基因,，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負荷和存活。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,，這是因為這些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進入靶細胞（包括病細胞）中,。廈門正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體,，截留完成后,。

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）,。超離法是較常用的外泌體純化手段,，采用低速離心、高速離心交替進行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費時,，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。通過密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣,，耗時，對離心時間極為敏感

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細胞來源的外泌體,，包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞),、病細胞、上皮細胞和間充質(zhì)細胞,，釋放出帶有載體的外泌體,，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,，刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾?。和饷隗w可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),；體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用,。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA，蛋白等物質(zhì)改變受體細胞的代謝狀態(tài),。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術(shù)已被許多臨床科研機構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：無需沉淀試劑,，也無需過夜培養(yǎng)。

外泌體的提取方法：1,、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高,、操作簡便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實驗，難以普遍普及,。2,、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物,，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),。南昌外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體提取色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進行分離的分析的方法,。武漢正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法,。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法,，主要用于生物大分子的分離、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別,，這使得提取的外泌體純度高，但是產(chǎn)量低,。Zarovni等分別用超速離心,、密度梯度離心和免疫層析法，從血漿和細胞上清中提取外泌體蛋白,，結(jié)果表明,，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標記蛋白(Alix、CD9,、CD63),，同時，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性,。武漢正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷