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植物RNA快速提取試劑盒:是一種單相RNA快速提取試劑盒,可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性,。細(xì)胞破碎之后,,植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合,。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白,、基因組DNA污染分離,,并清理植物多糖多酚以及次生代謝產(chǎn)物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,,并清理殘余的多糖,。提取可在60分鐘內(nèi)完成,所提取的RNA純度極高,,不含DNA和多糖和多酚污染,,可用于構(gòu)建cDNA文庫(kù)、RT-PCR,、Northern轉(zhuǎn)印分析,、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯,、和RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn),。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):RNA純度更高,無(wú)雜質(zhì)殘留,,特別適合于對(duì)純度要求很高的下游實(shí)驗(yàn),。徐州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商
動(dòng)物組織總RNA提取:1,、盡量選取新鮮的組織,,如果不是新鮮的(較好在三個(gè)月之內(nèi)-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時(shí),,不要拿到室溫直接剪取,,一定要放到冰盒上,盡量避免反復(fù)凍融,。2,、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織,剪取樣本時(shí)盡量剪組織中心的部位,,或者先將大塊的組織先從中間切開(kāi),,然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎,,將剪碎的組織放到無(wú)RNA酶的EP管中,,加入裂解液,剪碎的組織要充分接觸裂解液,,準(zhǔn)備勻漿,。3、正常組織選取綠豆粒大?。?0~60mg)的組織進(jìn)行勻漿,,如果組織中含有大量的蛋白,、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等,適當(dāng)增減剪取組織的量(可選10~20mg),。4,、如果提取的是魚(yú)肌肉,蝦肉,,海蜇等含水分較多的組織時(shí)則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量用量(推薦100~200mg),。5、條件允許的情況下,,動(dòng)物組織使用高通道組織勻漿機(jī)勻漿后即可直接進(jìn)行提取步驟,,如沒(méi)有該設(shè)備。6,、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上,,以減少RNA的降解。蘇州正規(guī)RNA提取試劑廠家批發(fā)價(jià)這種情況下,,可以在裂解緩沖液中立即進(jìn)行溶解,。
酵母RNA的提取方法:濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁,,其化學(xué)成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),,此外,脂類(lèi)8.5-13.5%,,蛋白質(zhì)6-8%,,還含有幾丁質(zhì),酵母菌的葡聚糖,,分子是為240000道爾頓,是一種分枝聚合物,,葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來(lái),。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過(guò)磷酸二酯鍵與磷酸邊接,所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細(xì)胞壁,。破壁方法有自溶破壁,、酶法破壁等多種方法,而用高濃度鹽溶液處理,,同時(shí)加熱,,以改變細(xì)胞的通透性,就可以使核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來(lái),。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過(guò)控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過(guò)離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達(dá)到提取之目的,。其中食鹽起到自溶促進(jìn)劑,以及防腐與脫臭的作用,。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),,博取眾家之長(zhǎng),,根據(jù)多年來(lái)市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來(lái)。具有操作步驟少,,實(shí)驗(yàn)快捷,,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿(mǎn)足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,,適用提取樣品普遍等特點(diǎn),。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上,。得到的RNA無(wú)DNA污染,,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對(duì)RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn),。1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長(zhǎng)的時(shí)間,,),。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,,保證后續(xù)RNA提取的得率,。(能完全通過(guò)化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用),。RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑,。
RNA的提取:眾所周知,,Trizol是一種RNA提取試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分,,壓制細(xì)胞釋放出核酸酶,,維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性,我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻,,在加入氯仿離心,,這樣的話(huà)我們的RNA就進(jìn)入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,,即可達(dá)到提取總RNA的目的了,。首先我們需要稱(chēng)取一定量的預(yù)處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH,攪拌抽提一定時(shí)間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點(diǎn),經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當(dāng)稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話(huà)RNA就出現(xiàn)了,分別測(cè)定吸光值A(chǔ)260和A280并計(jì)算A260/A280,,就可以測(cè)定RNA的提取率了,。當(dāng)然啦,我們還可以進(jìn)行深入研究,如測(cè)定Nacl的濃度,,PH的大小,,以及抽提時(shí)間對(duì)RNA提取率的影響啦。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,,沒(méi)有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR。青島正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷(xiāo)
植物RNA提取試劑:采用高效,、專(zhuān)一結(jié)合核酸的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng),。徐州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,,可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),,低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S),。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,,28S的位置大約在2kb,,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大,。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上,。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年,。RNA半衰期比較短,,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,,NorthernBlot等徐州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商