游離RNA(或稱循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡(jiǎn)稱cfRNA),即存在于細(xì)胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無(wú)創(chuàng)性診斷和研究的新分子標(biāo)志物,。文獻(xiàn)總結(jié)了以下兩個(gè)方面,,一方面游離RNA主要來(lái)源于tumour細(xì)胞,,另一方面tumour細(xì)胞來(lái)源有凋亡、壞死,、主動(dòng)釋放三種機(jī)制,,目前認(rèn)為以凋亡為主。游離RNA的生物學(xué)特征:游離RNA的結(jié)構(gòu)RNA相對(duì)DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復(fù)合物化學(xué)組成來(lái)保護(hù)RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨(dú)特的配方和添加劑,,能高效的分離血清,、血漿及其它無(wú)細(xì)胞體液等樣品中分離出游離的RNA,另外本試劑還可以有效地壓制各種外源性和內(nèi)源性的RNA酶,,同時(shí)結(jié)合特制的純化柱,,能較大限度的保持RNA的完整性、高得率以及純度,,并能保留小RNA,,為需要進(jìn)行小RNA研究,如RNA的用戶提供了強(qiáng)有力的工具,。血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,,產(chǎn)量大,。杭州RNA提取試劑哪里買
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢(shì):1、,、無(wú)DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會(huì)出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)。一些市面上單獨(dú)賣的去DNA污染的試劑,,效果不穩(wěn)定,,去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單,,去除DNA徹底,,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn),。2,、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過(guò)程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,,中草藥等多糖含量高的樣品,,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開(kāi)發(fā)了糖類清理劑,,PCR壓制物清理劑,,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品,。3、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題,。長(zhǎng)沙正規(guī)RNA提取試劑進(jìn)貨價(jià)在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K,、溶菌酶等)。
RNA提取試劑的選擇:首先,,要確定材料的可用性,。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理,。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,,但是由于種種原因無(wú)法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí),使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,,同時(shí)也可以有效解決組織,、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問(wèn)題。此外,,如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化,減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差~
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1,、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,,或者是在提取過(guò)程中導(dǎo)致的降級(jí);應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取,,采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時(shí)置于液氮或者-80℃冰箱凍存,,并減少反復(fù)凍融。在RNA提取過(guò)程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭,、離心管及其他材料,,提取過(guò)程盡可能的快,提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時(shí)放于-80凍存,。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè),則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳,,電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的,。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,,洗滌液中含有乙醇,,在提取過(guò)程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒(méi)有充分晾干導(dǎo)致的,,殘留的鹽及有機(jī)溶劑對(duì)后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,,因此在提取過(guò)程中應(yīng)充分去除組織裂解液,洗滌時(shí)應(yīng)充分,,使管壁四周均能被洗滌到,,另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟,會(huì)進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留,。植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,配合特殊的提取緩沖液,。
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性,。無(wú)論是人,、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織,,該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果,。TRIpure試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成,。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,,故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交,、poly(A)+選擇,、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等,。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對(duì)照顯示,,公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過(guò)了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量。RNA提取試劑注意事項(xiàng):TRIReagent抽提總RNA的同時(shí),,理論上也可抽提蛋白和DNA,。金華RNA提取試劑銷售廠家
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便,,顏色鮮明,,便于分層。杭州RNA提取試劑哪里買
DNA稱脫氧核糖核酸,,是一種分子,,雙鏈結(jié)構(gòu),由脫氧核糖核苷酸(成分為:脫氧核糖,、磷酸及四種含氮堿基)組成,。可組成遺傳指令,,引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機(jī)能運(yùn)作,。主要功能是長(zhǎng)期性的資訊儲(chǔ)存,可比喻為“藍(lán)圖”或“食譜”,。RNA稱核糖核酸,,是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息傳遞過(guò)程中的橋梁,。RNA的堿基主要有4種,,即A腺嘌呤,,G鳥(niǎo)嘌呤,C胞嘧啶,,U尿嘧啶,。其中,U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基,。RNA是核糖核酸,,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:1.兩性解離:DNA無(wú),,bai只有酸解離,,堿基被屏蔽(在分子內(nèi)部形成了H鍵)。RNA有,,有PI,。2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子長(zhǎng)度/直徑?jīng)Q定,,DNA為線狀分子,,RNA為線團(tuán)。3.堿的作用:DNA耐堿RNA易被堿水解,。4.顯色反應(yīng):鑒別DNA和RNA+濃HClRNA------→綠色化合物DNA------→藍(lán)紫色化合物苔黑酚,。二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對(duì)DNA染色,原理是卡在分子中,,DNA的離心和電泳顯色可用它們,。杭州RNA提取試劑哪里買