由歐洲多國細胞外囊泡領(lǐng)域的學者發(fā)起并成立的國際細胞外囊泡協(xié)會（ISEV）于2014年在協(xié)會會刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個指導性意見,，也就是我們常說的MISEV2014。2018版《指導要求》進行了修訂,。2018版的《指導要求》首先討論了對這些細胞來源的非細胞具膜結(jié)構(gòu)如何稱呼,。學者們普遍認為應(yīng)當使用細胞外囊泡（extracellularvesicle）來稱呼這些具膜囊泡，當我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們,。靜置10～15分鐘,，留取沉淀物備用。開封外泌體提取試劑廠家批發(fā)價

Exosome,，中文名外泌體,，是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物,。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,，能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復等,。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，能很好的保護其包被的物質(zhì),，且能靶向特定細胞或組織,，因此是一種很好靶向給藥系統(tǒng)（targeteddeliverysystem）。開封外泌體提取試劑廠家批發(fā)價外泌體的提取分離：超速離心法（差速離心）,。

外泌體與肺病預后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),，進一步研究發(fā)現(xiàn),，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關(guān),。

外泌體是細胞間進行物質(zhì)運輸和信息交流的重要工具,，可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移,。與細菌傳染,，幫助細菌逃避免疫關(guān)系很大，并與心血管疾病,，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系,。外泌體可通過流式、WB（檢測指標有CD9,CD63,CD81）,、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測，普遍應(yīng)用于藥物載體,、疾病診斷marker,、精細醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小,，樣本含量低，提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等,。但到目前為止,，仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性,。外泌體的提取方法：色譜法,。

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體,，經(jīng)過400×g,、2000×g、10000×g的低速離心,，除去細胞及大的細胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單,，不需要復雜的技術(shù)支持,，并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時,、產(chǎn)率低,，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,，但也會有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體,。外泌體提?。和ㄟ^色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會改變囊泡的結(jié)構(gòu),。開封外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,，便可獲得外泌體。開封外泌體提取試劑廠家批發(fā)價

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA,，能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達,，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程,。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結(jié)合,，從而阻滯整個生物通路。因此,，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達，與75例健康者相比,，發(fā)現(xiàn)了兩種高表達的miRNA（miR-25和miR-223）,。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估,，結(jié)果顯示，12個一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達,。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,，發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a,、-139-5p,、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908,。離心除去細胞器,，留取上清。開封外泌體提取試劑廠家批發(fā)價