外泌體的提取的方式：1,、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。2,、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。六是色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì)。開封正規(guī)外泌體提取試劑平均價(jià)格

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉(zhuǎn)子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉(zhuǎn)子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來自2×107個(gè)細(xì)胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過濾膜除菌后凍存于-80℃?zhèn)溆?。（該步驟參考文獻(xiàn)“腫瘤細(xì)胞來源胞外體的分離鑒定與功能檢測”）優(yōu)點(diǎn)是：分離得到的外泌體純度很高,。缺點(diǎn)是：步驟繁瑣、耗時(shí)耗力,、對離心時(shí)不好把握,。天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml,，具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液,、尿液,、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),，都可以產(chǎn)生并釋放exosome,。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì),、mRNA、miRNA,、lncRNA,、circRNA，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,，參與細(xì)胞間通訊,。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng),、血管生成,、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用,，不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病,。miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子,，它可以通過外泌體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)運(yùn)到另外一個(gè)地方行使基因沉默功能,。通過檢測外泌體中miRNA表達(dá)變化，可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細(xì)胞來源的外泌體,，包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,，釋放出帶有載體的外泌體,，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,，刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾病：外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用,。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),；體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。外泌體提?。菏褂每贵w包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體,。

外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,；樣本輸入量多樣,；無需耗時(shí)的超速離心，過濾或特殊注射器,；無需沉淀試劑,，也無需過夜培養(yǎng)；無需蛋白酶處理,；適用于多種物種,；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,，以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中,，攜帶和傳遞重要的信號分子,，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān),。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：適用于多種物種,。杭州外泌體提取試劑

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范、統(tǒng)一定量及鑒定等,。開封正規(guī)外泌體提取試劑平均價(jià)格

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1,、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿,。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體,，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響,。2,、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān),，這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或酶有競爭作用,。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合,，阻止細(xì)胞攝取外泌體,。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達(dá)莫（CTAD）,，CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體,。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇,。此外,，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進(jìn)外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數(shù)量,。開封正規(guī)外泌體提取試劑平均價(jià)格