與DNA不同,,RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子,,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu),但是很多RNA也需要通過(guò)堿基配對(duì)原則形成一定的二級(jí)結(jié)構(gòu)乃至三級(jí)結(jié)構(gòu)來(lái)行使生物學(xué)功能,。RNA的堿基配對(duì)規(guī)則基本和DNA相同,,不過(guò)除了A-U、G-C配對(duì)外,,G-U也可以配對(duì),。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,,RNA主要分三類(lèi),,即tRNA(轉(zhuǎn)運(yùn)RNA),rRNA(核糖體RNA),,mRNA(信使RNA),。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,;rRNA是組成核糖體的組分,,是蛋白質(zhì)合成的工作場(chǎng)所。較佳方法是保證樣品完全裂解,,但相同的裂解方案換了一個(gè)樣本可能就沒(méi)轍了,。天津正規(guī)RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,,可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),,低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S),。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,,28S的位置大約在2kb,,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大,。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上,。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年,。RNA半衰期比較短,,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,,NorthernBlot等徐州RNA提取試劑價(jià)格總RNA提取試劑:適用于植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA,。
miRNA是一類(lèi)內(nèi)源性的約22個(gè)核苷酸的非編碼RNA分子,,可參與轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控。在細(xì)胞的分化和發(fā)育,,細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和對(duì)傳染的應(yīng)答等生物學(xué)過(guò)程中,,miRNA發(fā)揮了重要作用。成熟的miRNA主要通過(guò)翻譯壓制來(lái)調(diào)控內(nèi)源性基因的表達(dá),。miRNA的應(yīng)用有miRNA模擬物和壓制劑,。miRNA模擬物是化學(xué)合成的雙鏈RNA分子,通過(guò)傳染到細(xì)胞中,模擬成熟的內(nèi)源性miRNA分子,;miRNA壓制劑是單鏈經(jīng)過(guò)修飾的RNA分子,,通過(guò)傳染到細(xì)胞中,特異性的壓制miRNA的功能,。miRNA模擬物和壓制劑可以用于研究單個(gè)miRNA錯(cuò)誤調(diào)節(jié)所造成的生物學(xué)影響,,也能用于確定某個(gè)miRNA分子的特異性靶標(biāo)基因。同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)miR-143可調(diào)控KRAS原病基因,,為病癥的醫(yī)治提供了新的靶點(diǎn)和醫(yī)治方法,。
RNA是核糖核酸,是存在于生物細(xì)胞以及部分病菌,、類(lèi)病菌中的遺傳信息載體,。RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成的長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子則由磷酸,,核糖和堿基構(gòu)成,。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,,RNA主要分三類(lèi),,即tRNA、rRNA,,以及mRNA,。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,;rRNA是組成核糖體的部分,,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類(lèi)和功能不一的小型RNA,,可調(diào)節(jié)基因表達(dá),。而其他如I、II型內(nèi)含子,、HDV,、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過(guò)程的活性,即具有酶的活性,,這類(lèi)RNA被稱(chēng)為核酶。RNA提取試劑:能夠作RNA印跡分析,、斑點(diǎn)雜交,、poly(A)+選擇。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢(shì):1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長(zhǎng)的時(shí)間)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,,保證后續(xù)RNA提取的得率,。(能完全通過(guò)化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用),。3,、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專(zhuān)一吸附特性和強(qiáng)吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,,尤其是對(duì)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,,沒(méi)有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR。天津正規(guī)RNA提取試劑
拭子RNA提取試劑的選擇,?離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好,、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng)。天津正規(guī)RNA提取試劑
眾所周知,,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作,。常見(jiàn)的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染,。此外,,不同的樣品類(lèi)型有自己獨(dú)特的特性,需要特別注意,。例如,,微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類(lèi),、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,,不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類(lèi)型,,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類(lèi),、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),,可與RNA共沉淀,,并可壓制下游分析,如RT-qPCR,。RNA是不穩(wěn)定的,,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,,會(huì)快速降解RNA,。為了使之較小化,,較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍,、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室,。然而,這些方法也有缺點(diǎn),,如核酸的凍融損傷,,并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法。天津正規(guī)RNA提取試劑