一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異,。止血材料是常見的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn),;同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,,導(dǎo)致傷口潰爛,或者因為粘附導(dǎo)致傳染,;再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來生產(chǎn)的。現(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素,、α-氰基丙烯酸酯類組織膠,、醫(yī)用止血明膠等,但是都有各自的缺點(diǎn),。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高,;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì);醫(yī)用止血明膠黏附性較差,,易脫落,,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,。徐州武漢鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,,培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,,pH左右時可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長,、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長。使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。杭州武漢鼠尾膠原在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,。
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,收集上清液,;在冰水浴中,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,,調(diào)節(jié)pH=6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀。
為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,,要從它們身上取下足量的細(xì)胞用于實驗,。為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作,剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇,。就讓我們來盤點(diǎn)一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴,、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」,。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化,,確認(rèn)小鼠是否患上了糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等,。比起心臟和眼部取血,實驗用鼠尾尖取血的取血量較小,,但取血之后,,小鼠還能繼續(xù)下一步建模或者實驗,,完全沒有性命之憂,。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同。
實驗應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),,應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開,;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動頻率是相同的,;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑。制備鼠尾膠原:將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,。杭州武漢鼠尾膠原
注意事項:在室溫下pH 中性時可迅速成膠,在操作過程中要 盡量保持低溫,。徐州武漢鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實驗室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來制造一種凝膠,,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基。此外,,還可以把它當(dāng)膠水使用,。在化妝品行業(yè),鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠,。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜,。不過,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取。不過,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取。徐州武漢鼠尾膠原