無血清凍存液通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規(guī)細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。配方成分明確,，不含動物來源性蛋白,，不含血清,，可減少各類細菌,、病毒和支原體等污染,，保證凍存細胞的安全,。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。該產(chǎn)品添加了細胞沉降穩(wěn)定劑,，可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓,，影響細胞凍存效果,。另外，添加了細胞膜保護劑,、滲透性細胞膜內(nèi)保護劑,、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,，發(fā)生水合作用,，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成，能較大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷,，有效提高細胞復(fù)蘇存活率,。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清,、不含動物源性蛋白,，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,，保證凍存細胞的安全,；不光適用于常規(guī)細胞系、原代細胞,，同時亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力。珠海無血清細胞凍存液直銷價

細胞凍存和復(fù)蘇操作步驟：細胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,，慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外,，減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會，快融以保證細胞外結(jié)晶快速融化,，避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi),，再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,，實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,，減少細胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。貴陽無血清細胞凍存液進貨價無血清細胞凍存液的優(yōu)勢：可培養(yǎng)板整板凍存,，例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程,。

細胞凍存時間和操作步驟：1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,，通常細胞凍存液含10%的DMSO,，或者是甘油、10-20%的小牛血清,；,、取對數(shù)生長期細胞，并且還需要用PBS進行清洗,，需要注意在這里要丟棄掉舊的細胞凍存液,；3.去除PBS，加入適量的胰蛋白酶,，以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,，然后把單層生長的細胞消化掉；然后離心1000rpm5min時間,；4,、去除胰蛋白酶，加入凍存培養(yǎng)液,，輕輕吹打使細胞的分布變得均勻,，調(diào)節(jié)細胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml，需要注意這是較佳的細胞密度,；5,、將細胞裝入凍存管之中，每管的含量應(yīng)該保持在1～1.5ml之間,。在凍存管上標明細名稱、時間,、操作者,；6、較后要說的就是細胞凍存的時間了,，對于標準的凍存程序來說,，需要進行梯度降溫，降溫速率-1～-2℃/min，一旦溫度達到-25℃以下時,，那么就可增至-5℃～-10℃/min,；等到-100℃的時候，可迅速的放入到液氮之中,。也可將凍存管放入-20℃冰箱中兩小時,，然后放入-70℃冰箱中進行過夜，較后取出凍存管并移入到液氮容器內(nèi),。

細胞凍存,，我們應(yīng)該注意哪些事項：DMSO快速稀釋會對細胞造成滲透性損傷，使存活率下降50%,。對于DMSO凍存的細胞,，復(fù)蘇后應(yīng)緩慢稀釋成細胞懸液：1）凍存液：培養(yǎng)基=1:1稀釋成細胞懸液后離心，然后重懸至培養(yǎng)皿中培養(yǎng),，隔天換液,；2）凍存液：培養(yǎng)基=1:10稀釋成細胞懸液，不用離心,，直接放置到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-4小時后,，換液。上述兩種方法都是比較常用的細胞復(fù)蘇方法,，后者更適用于原代細胞或比較難養(yǎng)的細胞,。液氮內(nèi)的細胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細胞應(yīng)一段時間內(nèi)進行更替,。一個細胞系在培養(yǎng)一個月后,，可復(fù)蘇一管新的細胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化，傳代幾次后,，再凍存留種,。無血清凍存液用途：本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過保質(zhì)期,，必須放棄使用,。

細胞凍存的注意事項：1.為保持細胞較大存活率，一般都采用慢凍存融的方法,。2.凍存物距液氮面越近溫度越低,。標準的低凍速度為－1℃~12℃/分鐘，當溫度下降達－25℃時,，下降速度可增至－5~－10℃/分鐘,，到－100℃時則可迅速凍入液氮中。因此要適當掌握凍存物下降入液氮中的速度,，過快能影響細胞內(nèi)水分透出,，太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時，宜先用細木棒伸入罐中探測液面位置,，然后需用溫度計與凍存物并行的辦法,，以觀測下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系,，當已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,，光按下降時間和下降距離便可獲理想凍存效果。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：即用型,，無需現(xiàn)配,，即開即用。珠海無血清細胞凍存液直銷價

度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中,。珠海無血清細胞凍存液直銷價

無血清快速細胞凍存液保存條件：儲存于4℃以下,。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期2年,。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,，盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,，推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法：選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率,。1,、按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2,、按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù),。3、取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,，置于離心管中,，離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃,，3~5min）,。移去離心管中的上清液。4,、加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,，制成細胞混合液,。5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中,。6、直接將含細胞混合液的凍存管放入-70℃以下冰箱，長期冷凍保存,。7,、若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-70℃以下冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐,。珠海無血清細胞凍存液直銷價