無(wú)血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對(duì)比：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,，其中DMSO的含量是10%,，血清的含量是10%，統(tǒng)稱(chēng)為含血清細(xì)胞凍存液,。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜）,，較后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存?？梢?jiàn),，含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題：1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買(mǎi)市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣，耗時(shí)耗力,。3.含血清,，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高,。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,，且不能原位（如孔板）凍存,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液，2-8℃保存即可,，無(wú)需再進(jìn)行分裝,。合肥南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：當(dāng)溫度進(jìn)一步下降，細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰,，產(chǎn)生冰晶損傷,。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷,。因?yàn)槔鋬霰Ｗo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合，從而降低冰點(diǎn),，減少冰晶的形成,，并且通過(guò)其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷,，細(xì)胞得以在較低溫條件下保存,。在復(fù)蘇時(shí)，一般以很快的速度升溫，1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫,，細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶,，也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間，從而無(wú)冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,，凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能,。上海天津無(wú)血清細(xì)胞凍存液無(wú)血清凍存液用途：無(wú)血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件：置于2～8℃避光保存，有效期為1年,。

使用方法：1)細(xì)胞超凈臺(tái)無(wú)菌環(huán)境,，1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞，細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,，混懸液體積為200μl,。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷，逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,，細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4,。2)開(kāi)啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min,，較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存,。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比，具體結(jié)果如附圖1所示,，可見(jiàn)采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率,。其他實(shí)施例通過(guò)與比較例1進(jìn)行比較，也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果,。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率,，同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,，細(xì)菌,，朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）,，大部分的干細(xì)胞,，凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白,，不含血清成分,，可有效減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染,，保證凍存細(xì)胞的安全,。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,，提高細(xì)胞存活率和活力,，亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：1、無(wú)需程序性降溫,，可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,，凍存液無(wú)需稀釋。2,、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存,。3、凍存液不含血清等,，較大降低細(xì)胞污染的可能性,。保存方法：冰袋運(yùn)輸，4℃保存,，保質(zhì)期一年,。細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液的操作規(guī)范：1,、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期,，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài),、有無(wú)污染等,。選擇狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作(注：貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化,，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞,，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù))。2,、500～1000g離心5min,，棄上清。3,、加入適量的細(xì)胞凍存液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1～10×106/ml,，置于凍存管中密閉,。4、采取逐級(jí)降溫保存：4℃放置20min,，-20℃放置30min,，-70℃過(guò)夜，置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ),。注意：務(wù)必超凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作,，避免污染。雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇,，以檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性,。凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。北京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液價(jià)格

無(wú)血清細(xì)胞凍存液,，通用于人和各種動(dòng)物細(xì)胞株,。合肥南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí)，必須遵守以下原則,。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明,，以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前,。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系,。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器，使溫度每分鐘大約降低1°C,。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基,。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑合肥南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液