無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一種無(wú)血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年),。CELLSAVING配方成分明確,,不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,不含血清,,可減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全,。細(xì)胞凍存液操作簡(jiǎn)便,,無(wú)需程序降溫,可在-80度或液氮中長(zhǎng)期保存,。相比于傳統(tǒng)凍存液,,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,,以及細(xì)胞多能性,,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過(guò)動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測(cè),,包括靜脈注射,,皮下注射途徑,無(wú)明顯細(xì)胞毒性,,動(dòng)物安全性非常高,。無(wú)血清凍存液特性:不需回溫,完全即用型,。合肥無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”,,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜(DMSO)作為保護(hù)劑,,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,;緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的物理?yè)p傷,。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。血清完全細(xì)胞凍存液,,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方有效提高細(xì)胞存活率和活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,,能減少各類(lèi)病毒,、霉菌和支原體等污染,確保凍存細(xì)胞安全,。適合用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。上海正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷(xiāo)廠家細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液復(fù)蘇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,,3~5min),移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn):一般來(lái)說(shuō),,細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移和保存,較佳的策略是進(jìn)行低溫保存(-70℃~-196℃),,而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),,故而可以長(zhǎng)期保存,。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程,,在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷,。經(jīng)過(guò)前人的長(zhǎng)期試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇基本原則是慢凍速融,,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。度保存的無(wú)血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中,。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:凍存注意:開(kāi)蓋之前,,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說(shuō)明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存,。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存,。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來(lái)源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿,,請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積,。1.在室溫(15-25°C)以300xg離心5分鐘。2.輕輕吸走上清液,,注意不要擾動(dòng)細(xì)胞團(tuán),。3.用血清學(xué)吸管以1mL的TBD-698重懸細(xì)胞。在打散細(xì)胞團(tuán)時(shí),,盡量減少細(xì)胞聚集體分解,。4.用2mL的血清學(xué)吸管將1mL的細(xì)胞聚集體轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細(xì)胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法,,每分鐘降低1度,,隨后可以在-196°C液氮長(zhǎng)期保存。不推薦在-80°C長(zhǎng)期保存,。逐步降溫法:-20°C保存2個(gè)小時(shí),,然后-80°C中保存2個(gè)小時(shí),隨后可以在-196°C液氮中長(zhǎng)期保存,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無(wú)動(dòng)物源組份。寧波無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:不含牛血清,,無(wú)動(dòng)物源組分,。合肥無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
細(xì)胞凍存經(jīng)驗(yàn)談:選對(duì)凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)或臨床使用,?;具^(guò)程相當(dāng)簡(jiǎn)單:慢慢冷凍細(xì)胞,將凍存管放入液氮中,,并在需要時(shí)快速解凍,。凍存培養(yǎng)基能支持細(xì)胞并防止冰晶形成。不過(guò),Malfavon的體驗(yàn)告訴我們,,使用不同的凍存培養(yǎng)基,,結(jié)果那可是大不同。一些經(jīng)驗(yàn)老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基,。不過(guò),,那些面對(duì)脆弱細(xì)胞(比如原代和多能細(xì)胞)的研究人員,則更喜歡購(gòu)買(mǎi)標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品,。一些非常敏感的細(xì)胞系也許能從添加物中受益,,以避免細(xì)胞在解凍時(shí)凋亡。合肥無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家