細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,,減少細(xì)胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù),。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,,起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,,利用凍存技術(shù)可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。目前現(xiàn)有技術(shù)中,,細(xì)胞凍存液中的主要成分有10%二甲基亞砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS),、剩余組分為完全培養(yǎng)基,。培養(yǎng)基以及FBS可為細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)。DMSO是一種滲透性保護(hù)劑,,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),,減少冰晶的形成,從而達(dá)到降低細(xì)胞損傷的保護(hù)效果,。但FBS屬于動物源性物質(zhì),,成分比較復(fù)雜,,在臨床應(yīng)用上存在潛在的風(fēng)險,也增加了污染的幾率,,并且由于凍存液中含有動物血清,,會導(dǎo)致凍存液的成分存在不穩(wěn)定的因素。無血清凍存液特性:不含動物成分,。天津正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇操作步驟:細(xì)胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,,慢速冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水份滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)形成冰晶的機(jī)會,,快融以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,,避免慢速融化水份滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細(xì)胞的損傷,。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷,。青島無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價凍存要求發(fā)生改變,因?yàn)閮龃婕?xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用,。
無血清細(xì)胞凍存液的用途:用途:1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存。2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,,無動物源組分,。傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成,。胎牛血清取自牛,因此,,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域,。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,無動物源組分,。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,,無需冷凍,,即取即用。為了避免反復(fù)凍融,,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。無血清細(xì)胞凍存液,,2-8℃保存即可,,無需再進(jìn)行分裝。
無血清細(xì)胞凍存液通用于各種動物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),,大部分的干細(xì)胞,,凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存。不含動物源性蛋白,,不含血清成分,,可有效減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,,保證凍存細(xì)胞的安全,。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,,提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢:1,、無需程序性降溫,,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,凍存液無需稀釋,。2,、細(xì)胞可于-80℃長期保存。3,、凍存液不含血清等,,較大降低細(xì)胞污染的可能性。保存方法:冰袋運(yùn)輸,,4℃保存,,保質(zhì)期一年。無血清細(xì)胞凍存液,,2-8℃保存即可,無需再進(jìn)行分裝,。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,,電解質(zhì)等的改變,,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),,而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng),,它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,;細(xì)胞儲存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,,理論上儲存時間是無限的,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。太原正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商
反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,每管500ul-1000ul,。天津正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價
細(xì)胞凍存,,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、有文獻(xiàn)表明,,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,,目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min,、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中,。2、正常情況下,,經(jīng)過-20℃1h30min這一步后,,凍存管內(nèi)的細(xì)胞已經(jīng)處于凝固狀態(tài),如果此時凍存管內(nèi)還是液體,,很可能是DMSO或冰箱冷凍功能出現(xiàn)了問題,。如若遇到這種情況,不能因?yàn)闀r間到了,,就把把液體狀態(tài)的凍存管放置到液氮中,,可以適當(dāng)延長在-20℃環(huán)境下的冷凍時間30-60分鐘,直至凍存液凝固后再放到液氮中。天津正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價