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酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,,一碰即散,。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2),。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2,、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型,。南昌鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來制造一種凝膠,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基,。此外,,還可以把它當(dāng)膠水使用。在化妝品行業(yè),,鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠,。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜。不過,,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取,。不過,,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取,。南京正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。
要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,,無齒鑷1把,,200ml燒杯1個(gè),培養(yǎng)皿1個(gè),,帶蓋廣口瓶1個(gè),,離心管、小瓶數(shù)個(gè),,滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,,洗凈,,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置48小時(shí),,離心。吸取其上清,,分裝至小瓶,,4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成,。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進(jìn)行酶解,。
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。唐山鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)
建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。南昌鼠尾膠原
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異,。止血材料是常見的醫(yī)療器械產(chǎn)品,。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn);同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除,,導(dǎo)致傷口潰爛,,或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染;再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來生產(chǎn)的?,F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類組織膠,、醫(yī)用止血明膠等,,但是都有各自的缺點(diǎn)。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高,;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì),;醫(yī)用止血明膠黏附性較差,,易脫落,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等,。南昌鼠尾膠原