鼠尾膠原實驗應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,,細胞角蛋白18表達陽性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉。凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至目,。昆明正規(guī)鼠尾膠原單價
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。廈門濟南鼠尾膠原為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,要從它們身上取下足量的細胞用于實驗,。
除了讓細胞更好貼上去,,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長,。當(dāng)然,,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,,制作止血海綿敷料等各種用途,。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,,對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,,往往會選用經(jīng)典的PCR法,。
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實驗內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復(fù)步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),;6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,;7,、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液,;8,、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期,;9、離心,,4000轉(zhuǎn)/分,,10-15分鐘;10,、吸取上清,,分裝成小瓶,4℃保存,。自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,,細胞角蛋白18表達陽性。
對于生物科研汪們來說,,大白鼠,、小白鼠們簡直渾身是寶,從毛發(fā)、皮膚,,到心肝脾肺,,甚至各種排泄物,都是我們重要的研究對象,。尾巴,,自然也是。所以耗子尾汁不僅存在,,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象,。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒有「耗子尾汁」,,很多課題可能都沒辦法開展,。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA,。可以理解為給小動物做核酸檢測,??芍苯踊蜷g接參與細胞的附著。天津鼠尾膠原價格
制備鼠尾膠原:重復(fù)步驟2,、3,,直至尾腱量夠用。昆明正規(guī)鼠尾膠原單價
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達,。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細胞存活率及細胞內(nèi)過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。昆明正規(guī)鼠尾膠原單價