鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,，但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,，對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實驗組）和普通培養(yǎng)皿（對照組）中，并且均用0,，10,，100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài)，應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,，TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),，流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,，黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,，Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá),。I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體。蕪湖貴陽鼠尾膠原

鼠尾膠原實驗應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實驗中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實驗中,，自制的鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長時間（約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。成都正規(guī)鼠尾膠原平均價格利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠,，模擬真實的生長環(huán)境，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長,。1,，在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上，pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,，檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長,、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長,。使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中。

一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,，其特征在于,，步驟如下：(1)膠原紡絲液的配制：將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,，用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,，再用雙氧水溶液殺酶；將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,，然后用乙酸溶液溶脹,，把溶脹后的切片分散攪拌，然后用濾網(wǎng)過濾,，除去雜質(zhì)及不溶脹物，然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液,；(2)手術(shù)縫合線纖維的成形：將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機的紡絲液貯罐中，用氮氣擠壓入含有pH＝8-11,、質(zhì)量濃度為50-80％的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,，再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90％的乙醇水溶液的脫水浴脫水,，再經(jīng)過假捻器加捻，合股后再進(jìn)入含有pH＝9-11,、質(zhì)量濃度為0.8-1.2％戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián)，經(jīng)過水浴水洗,，再經(jīng)第二次加捻，除去水及交聯(lián)劑,，干燥后，在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線,。制備鼠尾膠原：重復(fù)步驟2、3,，直至尾腱量夠用,。

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,，經(jīng)過乙酸抽提,、離心,、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白，屬于醫(yī)藥級別產(chǎn)品,，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被）,，適合多種類型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、胚胎細(xì)胞,、肌細(xì)胞、肺細(xì)胞,、神經(jīng)鞘細(xì)胞等。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,，規(guī)格為6/24孔板,，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率，細(xì)胞增殖速度快,，形態(tài)均一，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高,。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用,。上海北京鼠尾膠原

鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。蕪湖貴陽鼠尾膠原

生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,，利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,，簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液，并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,，進(jìn)行多次真空冷凍干燥，并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3％以下的膠原蛋白微粉,；較后由滅菌,、無菌包裝，成品膠原蛋白粉末的純度在98％以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,，提高了產(chǎn)率和生物相容性，降低了成本,，適用于生物醫(yī)用材料,，所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。蕪湖貴陽鼠尾膠原