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所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,,但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng),。同時(shí),外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,;此外,,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些,?lexoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA,,包括circRNA、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類等信息,。lExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠,、小鼠,、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果,涉及蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類等信息,。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)
外泌體的提取、分離方法:尺寸排阻色譜法和超濾法,;尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論,,較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力,,從而保證了外泌體的完整性,。Mol等[13]對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示,,后者得到的外泌體的蛋白豐度高于前者,。這些基于過(guò)濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來(lái)的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過(guò)程中的一個(gè)準(zhǔn)備過(guò)程,,通過(guò)超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì),。不過(guò)連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時(shí)間內(nèi)分離出外泌體,。但是,超濾膜對(duì)外泌體的黏附作用會(huì)降低外泌體的產(chǎn)量,,并且超濾過(guò)程中施加的外力可能會(huì)使外泌體變形或者破裂,。上海正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話外泌體提取:可分離到大小相近的囊泡顆粒,。
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,還有研究表明,,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),,let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。
專利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行體外培養(yǎng),,直接把外泌體從尿液中沉降下來(lái),無(wú)須分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基,。人尿液來(lái)源細(xì)胞的外泌體的獲取方法,,是首先分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基,將人尿液來(lái)源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過(guò)0.22微米濾膜過(guò)濾,,以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì),;然后離心除去細(xì)胞器,留取上清,;再使用可截留100KD分子量的膜,,通過(guò)離心截留上清中的外泌體,截留完成后,,使用PBS對(duì)膜進(jìn)行洗脫即得到外泌體濃縮液,。形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。
外泌體在肺病治病中的作用:有研究發(fā)現(xiàn),,使用外泌體運(yùn)載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細(xì)胞對(duì)PTX的吸收,,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展,。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),,加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強(qiáng)的抗一些病癥功效,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,,由此可以證明,,外泌體制劑可以有效增強(qiáng)CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性。到目前為止,,外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,,有效的外泌體藥物遞送平臺(tái)的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在治病靶點(diǎn)的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領(lǐng)域有著廣闊的前景,,期待外泌體在肺病治病領(lǐng)域早日得到突破,,造福更多的患者。外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):無(wú)需蛋白酶處理,。鄭州外泌體提取試劑哪家便宜
由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,,使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體(LCC-exosome)可以通過(guò)刺激一些病癥血管的形成來(lái)促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng),。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,,LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進(jìn)一些病癥血管的生成,;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用,。此外,有研究發(fā)現(xiàn),,外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,,從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖,,遷移能力。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍,。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)