外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液,、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細菌,,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。南昌正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商
研究中研究人員發(fā)現(xiàn),,胃病細胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征,,并促進胃病細胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外,,研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動,。通過使用質(zhì)譜方法,研究人員確定載脂蛋白E(ApoE)是M2巨噬細胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì),。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì),,是決定胃病細胞遷移潛力的主要驅(qū)動因素。然而,,來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細胞的外泌體在體外和體內(nèi)對胃病細胞的遷移沒有顯著影響,。在機制上,M2巨噬細胞衍生的外泌體介導(dǎo)ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路,,并在TAM和受體胃病細胞之間進行細胞間轉(zhuǎn)移,,促進細胞骨架的遷移??偟膩碚f,,該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細胞,促進了胃病細胞的遷移,。溫州外泌體提取試劑進貨價外泌體提?。撼瑸V膜也可用于分離外泌體。
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,,還有研究表明,,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),,進一步研究發(fā)現(xiàn),。
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答,、抗原提呈,、細胞遷移、細胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,,促進了一些病癥的生長與侵襲,。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移,。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡,。治病靶標,。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,,以明顯降低RAS活化,、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫,。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗,。心血管,。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化。分子標記,。疾病診斷,。在酒精性肝病、NASH,、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升外泌體提取:聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,。
目前的主流觀點認為,,外泌體的產(chǎn)生過程為:細胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),,再形成多泡體(multivesicularbodies,,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質(zhì),、脂類、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年,,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome,。對于外泌體的作用,,當(dāng)時推測為細胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),,所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細胞的抗一些病癥反應(yīng),。2007年HValadi等進一步發(fā)現(xiàn)細胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞、細胞分化,、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠,、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離,。超濾離心法簡單高效,,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法,。杭州外泌體提取試劑報價
現(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞,、淋巴細胞、樹突狀細胞,、一些病癥細胞,、間充質(zhì)干細胞等。南昌正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商
外泌體在肺病進程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,,一些病癥細胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細胞,,壓制機體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,,可在免疫細胞中結(jié)合并啟動TLR8,,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號通路活化,,從而導(dǎo)致一些病癥的生長和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,,細胞間通訊扮演著重要的角色,。據(jù)有關(guān)報道稱,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),。此外,,啟動的T細胞可以通過調(diào)控Fas信號通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達,進而促進肺病的轉(zhuǎn)移,。這些機制有望成為肺病治病的潛在靶點,。雖然大多數(shù)外泌體都是促進一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,但也有報道稱,,外泌體miR-302b可以通過壓制TGFβRⅡ來壓制肺病細胞的轉(zhuǎn)移與增殖,。如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),,顆粒大小不均一,,產(chǎn)生難以去除的聚合物。南昌正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商