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來源: 發(fā)布時間:2021-11-21

鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,,純度達到95%以上,,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1,、SDS-PAGE分析純度大于95%。2,、無菌檢驗結(jié)果為陰性,。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,,貼壁及生長正常,。4、本品濃度1mg/mL,,pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,,NIH-3T3細胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常,。整個操作請在無菌環(huán)境下無菌操作,,避免污染以影響細胞生長。合肥鼠尾膠原單價

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I型鼠尾膠原是借鑒Navneeta Rajan, Jason Habermehl法,,經(jīng)過乙酸抽提,、離心、滅菌,、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白,屬于醫(yī)藥級別產(chǎn)品,,可用于包被細胞培養(yǎng)器皿(單分子層包被),,適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞、神經(jīng)節(jié)細胞,、胚胎細胞,、肌細胞、肺細胞,、神經(jīng)鞘細胞等。I型膠原蛋白包被細胞培養(yǎng)板,規(guī)格為6/24孔板,,表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,,可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附。使用這種細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞,,可以獲得良好的細胞貼壁率,,細胞增殖速度快,形態(tài)均一,,細胞培養(yǎng)成功率高,。金華正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,。

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鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,,收集上清液;在冰水浴中,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH = 6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀,。

鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。 實驗內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,;4,、重復(fù)步驟2、3,,直至尾腱量夠用,;5、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克),;6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,;7、按每克尾腱50ml的比例,,加入0.1%醋酸溶液,;8、搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期,;9、離心,,4000轉(zhuǎn)/分,,10-15分鐘;10,、吸取上清,分裝成小瓶,,4℃保存,。從包被表面除去多余的液體。過夜干燥,。

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鼠尾膠原蛋白I型,,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M 的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。 在接種細胞前用無菌的水漂洗。利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),。上海鼠尾膠原廠家批發(fā)價

在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。合肥鼠尾膠原單價

鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,臨床上常用的有人工骨移植,、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2],,由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白,,其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是,,自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,,數(shù)量有限,難以滿足臨床需要,。因此,,研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo),。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,,在分子結(jié)構(gòu)上,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,,沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長[3]。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu),,酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,,重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維,然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化,,通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化,。合肥鼠尾膠原單價

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