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來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-10

外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等,。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。同時(shí),不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,,包括外泌體,、微泡和凋亡小體。其中,,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,,由多種細(xì)胞分泌,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì),、脂質(zhì),、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì)。來源于不同的組織的外泌體不光具有其特異性蛋白分子,,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子,。外泌體提取的方法:過濾。廈門外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

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外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測(cè)到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測(cè)到α-synuclein,,ALS病人外泌體中也可以檢測(cè)到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,通過分析外泌體的組分,,可以幫助識(shí)別其來源的細(xì)胞類型,。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測(cè)試,。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層,。成都正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合。

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外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,;樣本輸入量多樣;無需耗時(shí)的超速離心,,過濾或特殊注射器,;無需沉淀試劑,也無需過夜培養(yǎng),;無需蛋白酶處理,;適用于多種物種;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,;可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,,以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中,,攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子,形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān),。

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來眾多文獻(xiàn)報(bào)道,肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,,是早期診斷肺病的有效途徑,。有研究發(fā)現(xiàn),NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,,因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),,進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物。近幾年來,,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,。外泌體:形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。

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1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),,所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng),。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞、細(xì)胞分化,、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中,。目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,,形成內(nèi)體(endosome),,再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),,較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類,、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,,并命名為exosome,。對(duì)于外泌體的作用,當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式,。外泌體的提取分離:密度梯度離心,。武漢外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)

外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,,使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,,可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)。廈門外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的提取分離:1,、超濾離心,。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì),,利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離,,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,,且不影響外泌體的生物活性,,是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法。2,、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63,、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,,即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高、操作簡便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,,不利于下游實(shí)驗(yàn),,難以普遍普及。廈門外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

與原代細(xì)胞相關(guān)的擴(kuò)展資料:

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原代細(xì)胞(primary culture cell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子,、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué),、基因組學(xué),、細(xì)胞株(系)研究、DNA,,RNA和遺傳學(xué)研究等,,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究,、**藥物的研究等,。原代細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用,市場前景廣闊,。