鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑，可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng),。制備鼠尾膠原方法：1,、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘,；2,、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高,，折斷尾骨后拉出尾腱,；3、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡,；4、重復(fù)步驟2,、3,，直至尾腱量夠用；5,、吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）；6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中；7,、按每克尾腱50ml的比例,，加入0.1%醋酸溶液；8,、搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9,、離心,，4000轉(zhuǎn)/分，10-15分鐘,；10,、吸取上清，分裝成小瓶,，4℃保存,。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。太原鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到 的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的 材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞 懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下 皮膚后.以 消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液. 用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平 皿.(3)鼠尾膠原 凝膠體的制備:具體方法參見文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴 入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中 30rain,散盡剩余氨氣,。金華廣州鼠尾膠原布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,。

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,，并重構(gòu)成膠原纖維,。然后，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6 d,，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2 d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,，膠原纖維部分礦化,；礦化6 d后，膠原纖維內(nèi)部完全礦化,，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。

膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí)、一般級(jí),、醫(yī)藥級(jí),。食用膠原一般來(lái)源于動(dòng)物的真皮、肌腱和骨膠原．其中皮膠原是主要的食用膠原,。食用級(jí)膠原通常外觀為白色,，口感柔和，味道清淡，易消化,。膠原的獨(dú)特品質(zhì)．使得它在許多食品中用作功能物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分,，具有其它替代材料無(wú)可比擬的優(yōu)越性：①膠原大分子的螺旋結(jié)構(gòu)和存在結(jié)晶區(qū)．使其具有一定的熱穩(wěn)定性；②膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),，使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,，適用于薄膜材料的制備；③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料．其獨(dú)特之處是：在熱處理過程中．隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化．膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí)，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,，不宜封接,。

以鼠尾膠原為支架的類似物的建立：探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法：原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,，制備鼠尾膠原，將鼠尾膠原溶液,、濃縮培養(yǎng)基,、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物。結(jié)果：形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,，并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力,。結(jié)論：①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,，該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),；②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性，它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型,。堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉、碳酸鈉等,。徐州鼠尾膠原廠家供應(yīng)

鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。太原鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來(lái)源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1,、vWF,、CD34、VE-cadherin,、GATA-2,。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31,。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能,。說(shuō)明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞。為研究胞外基質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號(hào)分子機(jī)制打下了基礎(chǔ),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。太原鼠尾膠原直銷廠家

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