無血清細(xì)胞凍存液用途:1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存,。2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,,無動物源組分,。傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成,。胎牛血清取自牛,因此,,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域,。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,無動物源組分,。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,,無需冷凍,即取即用,。為了避免反復(fù)凍融,,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存,。無血清細(xì)胞凍存液,,2-8℃保存即可,無需再進(jìn)行分裝,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:為了避免反復(fù)凍融,,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。蘇州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹
細(xì)胞凍存步驟說明:配制含10%DMSO或甘油,、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,,用PBS清洗,。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;離心1000rpm,,5min;去除胰蛋白酶,,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,,計數(shù),,調(diào)節(jié)存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,,凍存時間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中,。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,,移入液氮容器內(nèi),。蕪湖正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話無血清凍存液特性:適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。
無血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞實驗步驟:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中,。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106 cells/ml),。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,4℃,,3~5 min)。移去離心管中的上清液,。4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,,制成細(xì)胞混合液,。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,,長期冷凍保存,。7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。
無血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無血清細(xì)胞凍存液是一款針對細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液,。該凍存液采用獨特的凍存配方,,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,**降低了細(xì)胞在凍存過程中冰晶對于細(xì)胞的損傷,。凍存液中添加了葡萄糖,,氨基酸等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率,。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無任何動物源組分,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),,并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險,,確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,,無需程序降溫。鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。
以前在另一家實驗室的時候,凍存細(xì)胞根本就沒有講究這些標(biāo)準(zhǔn)操作,。凍存的細(xì)胞有293T,、PT67、C2C12,、MEF(鼠胚胎成纖維細(xì)胞),、HelaS3、HelaD,、U2OS,、HKC、RK3E,、ECO,、H292、HSY,、COS7,、SupT1等。將細(xì)胞酶消化后直接參與離心,,加入凍存液(含90%的血清和10%的DMS0),,直接放在-80℃冰箱。兩三天后移入液氮中,,較久保存,,幾年后細(xì)胞的活力仍沒有什么受損,照常能復(fù)蘇,成活率高,。但有三點須注意:(1)一是細(xì)胞的生長狀態(tài)要好,,不能長得過稀,同樣也不能過密,,細(xì)胞的狀態(tài)看起來相當(dāng)健康,。70%密度的要保存的細(xì)胞須再長24h才能全滿,萬一細(xì)胞狀態(tài)不好,,可以酶消化后再繁殖一次;(2)凍存細(xì)胞的量要留心,,不能太密也不能太稀,,一般1OOmm培養(yǎng)皿的細(xì)胞凍存為3~4管;(3)存放在-80℃冰箱的時間不能過長,,一兩天后轉(zhuǎn)移到液氮罐里,。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細(xì)胞,半年還有30%~50%的細(xì)胞有活性,,但一年的細(xì)胞就沒有活的,。細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。北京無血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)
無血清細(xì)胞凍存液使用方法:緩慢地混合均勻,,制成細(xì)胞混合液,。蘇州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:凍存細(xì)胞的效果好壞要看細(xì)胞復(fù)蘇時的存活率,。細(xì)胞凍存時,,細(xì)胞內(nèi)部會產(chǎn)生晶體,水凝固形成的高濃度溶質(zhì)會對細(xì)胞產(chǎn)生損傷,,所以在凍存過程中要盡可能降低晶體的產(chǎn)生,。為了提高復(fù)蘇存活率,可通過以下方法完成:a)降溫的速度不能太快,,讓細(xì)胞內(nèi)的水分緩慢離開細(xì)胞,;b)在低溫環(huán)境下凍存細(xì)胞可以降低高濃度鹽對細(xì)胞中蛋白質(zhì)的影響;c)凍存試劑要采用親水的低溫保護(hù)劑,;d)復(fù)蘇時的速度要快,,這樣可以減少細(xì)胞內(nèi)部冰晶溶解時產(chǎn)生的某些可溶性成分。蘇州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹