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產(chǎn)品特性:a.可直接放置于-80℃冰箱,,無需降溫,,節(jié)省時間和精力;b.即用型,無需現(xiàn)配,,操作方便,可減少實(shí)驗(yàn)中因操作引起的污染,;c.在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗(yàn)證,,其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上;d.可長期存儲于-80℃冰箱(5年以上),,取用方便,;e.采用成分明確的無血清配方,價格比常規(guī)自配細(xì)胞凍存液更為低廉,;保存溫度:2~8℃具體操作步驟:1,、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細(xì)胞按常規(guī)方法消化,或分離獲得原代細(xì)胞后,,收集于離心管中,。2、使用離心機(jī)離心,,去除上清,,收集細(xì)胞沉淀。3,、根據(jù)細(xì)胞生長密度加入適量的細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸,,充分混勻(推薦凍存密度為 1-2×106/ml)。4,、將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,,直接放置于-80℃冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選),。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:傳統(tǒng)的凍存液,,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成,。深圳正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家便宜
無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有:1.即用型,,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可,。2.通用型,,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞,。3.無需程序降溫,,可直接放置-80℃凍存,操作簡單,。4.不含血清,,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小,。6.無需液氮,,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程,。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO,、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷無血清凍存液用途:細(xì)胞保藏中心,,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長期保存,。
無血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,,混合均勻,。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,,3~5min),,移去上清液。4.清洗細(xì)胞,,充分洗凈殘留凍存液,。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰,。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰,,所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷,。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,,細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰,,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時,,大量水分會因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡,。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷,。無血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用,。為什么要進(jìn)行細(xì)胞凍存,?連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細(xì)胞系較終會發(fā)生衰老,,所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染,,即使運(yùn)轉(zhuǎn)情況較好的實(shí)驗(yàn)室也會遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源,,更換細(xì)胞系成本高昂,,而且耗費(fèi)時間,因此,,十分有必要將細(xì)胞冷凍起來長期保存,。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買,、寄贈,、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。一些保護(hù)劑,,易于穿透細(xì)胞,,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞。廈門天津無血清細(xì)胞凍存液
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,,原位凍存,,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,,省時高效。深圳正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家便宜
無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):1.將分裝好的細(xì)胞凍存管,,直接置于-80 度冰箱過夜保存,,次日投入液氮中保存即可 備注:1、凍存過程中,,第2 步在冰袋附近操作時,,低溫避免保護(hù)劑對細(xì)胞造成損傷。 2,、細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,,否則在復(fù)蘇過程中有可能會炸 (1)提前開啟水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)到37(2)將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出,,迅速置于水浴鍋中融化,,盡量1min 融化,時間越短,,對細(xì)胞影響越小,。(3)將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充 分混勻,(如細(xì)胞冷凍保存液為500ul,,則加入到5ml 新鮮培養(yǎng)基中,, 如細(xì)胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml 新鮮培養(yǎng)基中,。)(4)混勻后立即離心,,800 轉(zhuǎn),3min 即可離心結(jié)束后棄上清,,加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液,。(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培 養(yǎng)基要求決定,,通常為5%【注意事項(xiàng)】細(xì)胞系 凍存密度 備注 正常人成纖維細(xì)胞 1~310 cells/ml雜交瘤細(xì)胞 1~310 cells/ml某些hybridoma 會因冷凍濃度 太高而在解凍24小時后死去,。深圳正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家便宜
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