實驗應用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用,。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果,。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞,，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征,。結論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,，并且制作簡便,成本低廉。膠原蛋白是結締組織和內臟部位外基質的主要成分,。濟南鼠尾膠原銷售廠家

鼠尾膠原蛋白I型,，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M 的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2．建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。 4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,，這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。 在接種細胞前用無菌的水漂洗。天津正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上,， pH 左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和,。 需要的溶液 （均需要無菌、 預冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH,，0.1mol/L乙酸(一 般不用),，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中,， 會由于 NaOH 不能迅速混勻而產生局部的 膠原凝結） 立即混勻,。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右,，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加 酚紅,，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。

鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色,；礦化2 d后,，膠體的顏色逐漸加深至乳白色；礦化6 d后,，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內部,，膠體顏色加深至純白色，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體,，予鑷子夾起,，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示：礦化2 d后,，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結構逐漸模糊,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內部，膠原纖維部分礦化,，沿著膠原纖維生長,，忖度變深；礦化6 d后,，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結構完全消失,，膠原纖維內部可以看到黑色羥基磷灰石晶體，嵌入膠原纖維縱向生長,。當鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時,，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據，膠原纖維呈現(xiàn)黑色,，選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。

膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟部位外基質的主要成分,，但在皮膚、肌腱,、骨骼中分布*為普遍,。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構,，被普遍用于多種細胞的培養(yǎng)基質，如肝細胞,、纖維細胞,、脊髓神經節(jié)、雪旺氏細胞等,。另外,，I型膠原蛋白在細胞生長、分化,、遷移和組織態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應用,。注意事項：1） 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2） 整個操作請于冰上進行,，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。3） 整個操作請在無菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長,。開蓋在超凈臺上過夜晾干,，也可以在室溫放置1小時后。徐州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。濟南鼠尾膠原銷售廠家

一種基于鼠尾膠原蛋白：1.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料，其特征在于凍干止血材料中,，各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%,，余量的水。2.根據權利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,，其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾。3.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,，其特征在于劑型為創(chuàng)可貼,。4.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料，其特征在于劑型為噴霧劑,。濟南鼠尾膠原銷售廠家

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