膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),,使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,適用于薄膜材料的制備,;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì);3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán). 所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng). 這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠,;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,。杭州鄭州鼠尾膠原
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,,制備細(xì)胞爬 片時(shí),可在瓶底涂一層膠原,,再放上小玻片,,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通 過(guò)本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,,以及如何切割小玻片,,并利用鼠尾膠原將其固定于 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料: 大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理 鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: 1,、制備鼠尾膠原。 2,、切割小玻片,。 3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。南京鼠尾膠原平均價(jià)格將無(wú)組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用,。
鼠尾膠原的提取步驟:配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液(用鹽酸將其PH值調(diào)至7.5) 取鼠尾,,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,,置于生理鹽水中,,稱重,再倒掉生理鹽水,,酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,,(1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心,(8000rpm 5min) 其上清,,留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,,用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物,加入消毒過(guò)的攪拌 子,,冷房攪拌數(shù)天,,得絮狀膠原,。 注意所有和膠原有關(guān)的操作都在冰上進(jìn)行\(zhòng) Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液(用鹽酸將其pH值調(diào)至7.5); 于-20冰箱中取出鼠尾,,浸泡75%或70%酒精,,解凍; 在一小培養(yǎng)皿中放置少量生理鹽水,,置于電子秤上,,調(diào)零,; 取鼠尾,,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,,置于生理鹽水中,。
鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無(wú)菌下制備,純度達(dá)到95%以上,,可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠原凝膠,,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1,、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2、無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性,。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長(zhǎng)正常,。4,、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常。免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。
如何補(bǔ)充膠原蛋白我們都知道膠原蛋白本身是大分子,,不能被我們的腸胃直接吸收,而是會(huì)被分解轉(zhuǎn)化為氨基酸,,相當(dāng)于吃進(jìn)去了普通的蛋白質(zhì),。只有具備生物活性的小分子膠原蛋白,才能直接滲進(jìn)小腸黏膜細(xì)胞,,補(bǔ)充到全身肌膚中,。所以,,想要吃進(jìn)去的膠原蛋白能夠有美膚**的效果,首先要挑對(duì)膠原蛋白,。1,、口服含膠原蛋白的食物骨肉湯、口服膠原蛋白補(bǔ)品等都屬于膠原蛋白食物,。但由于會(huì)被人的消化系統(tǒng)過(guò)濾掉很大一部分,,且真正能到達(dá)肌膚并起到作用的量非常有限2.直接皮下注射主要用于填充深的皺紋,皮膚損傷造成的缺損(如青春痘疤)和修補(bǔ)臉形的缺陷等,。其效果立竿見(jiàn)影,,但注射到皮膚內(nèi)的膠原蛋白會(huì)被人體逐漸吸收,因此其功效只能維持半年至一年,,而且少數(shù)人群可能會(huì)出現(xiàn)過(guò)敏,、傳染等副作用。鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便。廈門正規(guī)鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原醋酸溶解:建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。杭州鄭州鼠尾膠原
鼠尾膠原膠凝程序:膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到堿性時(shí)凝膠。1)將無(wú)菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室,。用氫氧化銨使紗布飽和,,把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上,暫放置一邊,。2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,,厚度可以根據(jù)需要改變,膠原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的蓋玻片,。 對(duì)于直徑100mm的培養(yǎng)皿,,每個(gè)加入約6mL; 對(duì)于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL,對(duì)于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL,。3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘,。4)在無(wú)菌蒸餾水中(35mm培養(yǎng)皿加5mL,60mm培養(yǎng)皿加10mL等)浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min,。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無(wú)菌蒸餾水,,放置在層流罩中過(guò)夜。5)吸出蒸餾水,,用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C,。杭州鄭州鼠尾膠原
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