糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體,、霉菌、色素,、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟,。糖原累積病診斷和研究 ,,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等,。山東咨詢糖原染色試劑盒銷售廠家
染色流程相對簡便,、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,,無論對于量較多的整批次染色,,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時間、更為便捷,。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果,。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便,、省時,,同時陽性著染對比度也很明顯。特異性高,、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異,、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì),。浙江糖原染色試劑盒銷售廠家如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水,。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應重新配制使用),。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水,、透明,、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,,此時溶液應為無色。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差
糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖,、糖脂,、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,,沉積在細胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗),;2.滴加過碘酸溶液,氧化5min,;3.蒸餾水洗10min,;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min,;5.傾去Schiff試劑,,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,,染核1-2min,;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。取材必須新鮮,,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要,。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,,均來自我室實驗材料,。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,,過濾,,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h巨幼紅細胞貧血,、溶血性貧血,、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。江西品牌糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性,。山東咨詢糖原染色試劑盒銷售廠家
糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中,。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,,顆粒狀,,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x000c_臨床意義1,、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,,至成熟階段糖原含量十分豐富,。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀,。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應呈粗大的紫色顆?;驁F塊。正常紅系:陰性,。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,,以彌散性為主,;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒,、塊狀陽性反應山東咨詢糖原染色試劑盒銷售廠家