鼠尾膠原,，是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,，同時也是一種天然的黏附劑,，當我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,，制備細胞爬片時，可在瓶底涂一層膠原,，再放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。有點學術了,，聽不懂···貼壁,，有什么意義？分散的單一細胞培養(yǎng)能夠比較理想地反映細胞的具體生物特性,。選擇合適的培養(yǎng)基,，可以解決培養(yǎng)中細胞脫落和細胞重聚的現(xiàn)象。鼠尾膠原,，是一種細胞支持物,，它是細胞外基質的主要成份,，可直接或間接參與細胞的附著,。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備，純度達到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。成都鼠尾膠原廠家推薦

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等 步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細胞 培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞,。也可用于制備三維膠,，模擬真實的生長環(huán)境， 使細胞在三維環(huán)境中生長,。 1,，在使用鼠膠原蛋白 型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12 細胞的 貼壁和生長。 1mg/ml濃度以上,，pH 左右時可形成具有一定強度的三維膠,，檢查到 NIH-3T3 細胞在三維膠內(nèi)正常生長、PC-12 細胞在三維膠表面 正常生長,。 使用方法： 1,、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度： 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。開封鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I,、無菌10×PBS、無菌蒸餾水,、無菌1M NaOH,。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1M NaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）4.5混合管中的物質并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計算體積，混勻,，冰上備用,。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6）使用時,，無菌條件下將溶液加入到細胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入 690ul H2O,。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結）,，立即混勻,。再加入100ul 10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡,。取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘,。

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結構,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率,。結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的,。結論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。通常情況下骨質總量中的鈣,、鎂,、磷等無機物質光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機物質卻要占超過80%。深圳鼠尾膠原單價

膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內(nèi)臟部位外基質的主要成分,。成都鼠尾膠原廠家推薦

鼠尾膠原的提取步驟：配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液（用鹽酸將其PH值調至7.5） 取鼠尾,，去皮，由尖部向前分段抽取肌腱,，置于生理鹽水中,，稱重，再倒掉生理鹽水,，酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,，（1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心，（8000rpm 5min) 其上清,，留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,，用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物，加入消毒過的攪拌 子,，冷房攪拌數(shù)天,，得絮狀膠原。 注意所有和膠原有關的操作都在冰上進行\(zhòng) Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液（用鹽酸將其pH值調至7.5）,； 于-20冰箱中取出鼠尾,，浸泡75%或70%酒精，解凍,； 在一小培養(yǎng)皿中放置少量生理鹽水,，置于電子秤上，調零,； 取鼠尾,，去皮，由尖部向前分段抽取肌腱,，置于生理鹽水中,。成都鼠尾膠原廠家推薦