鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細(xì)胞爬 片時(shí),,可在瓶底涂一層膠原,,再放上小玻片,,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通 過本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,,以及如何切割小玻片,,并利用鼠尾膠原將其固定于 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料: 大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿、三角燒瓶,、燒杯,、量筒、天平,、生理 鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: 1、制備鼠尾膠原,。 2,、切割小玻片。 3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄。南京鼠尾膠原廠家供應(yīng)
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原,,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí),,前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,,不宜封接,;有鼠尾膠原時(shí),前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長(zhǎng)時(shí)間(約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)通常情況下骨質(zhì)總量中的鈣,、鎂,、磷等無(wú)機(jī)物質(zhì)光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機(jī)物質(zhì)卻要占超過80%。
鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,,簡(jiǎn)化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,;較后由滅菌,、無(wú)菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每 3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為 3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉。鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì),。
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150 μL滴在薄膜上,,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠( ,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,,一碰即散,。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130 000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170 000(圖 2) ,。膠原蛋白濃度為1.8 mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2、6 d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。寧波成都鼠尾膠原
生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境。南京鼠尾膠原廠家供應(yīng)
膠原蛋白的功效與作用:1,、可以作為一種補(bǔ)鈣食品,。膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的運(yùn)載工具,骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑,,它與羥摹磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體,。因此,只要攝入足夠的膠原蛋白,,就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量,,膠原蛋白可成制成補(bǔ)鈣的保健食品。2,、可以為特殊人群使用,。婦科疾病的根源來自于內(nèi)分泌失調(diào),膠原蛋白能夠改善婦科疾病的困擾,,而更年期的婦女更需要膠原蛋白供給身體所需,,使得更年期婦女能夠更輕松面對(duì)各種不適。南京鼠尾膠原廠家供應(yīng)