一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,,調(diào)節(jié)pH = 6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時(shí),,去除上清液,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀,; 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,,調(diào)節(jié)PH = 6.5 ;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,、陰離子交換樹(shù)脂進(jìn)行脫鹽處理; (8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),,然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,,滅菌,、包裝,得到成品膠原蛋白粉末,。制備鼠尾膠原:吸去生理鹽水,,將尾腱稱(chēng)重(0.5-1克)。鄭州正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,,并且均用0,10,,100μmol/L H2O2誘導(dǎo),。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),,應(yīng)用MTT 比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,,TUNEL 法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot 檢測(cè)凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá),。昆明鼠尾膠原廠(chǎng)家推薦制備鼠尾膠原:將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。
服用膠原蛋白的注意事項(xiàng):1,、大分子膠原蛋白進(jìn)入人體后需要降解為小分子肽,、氨基酸才能被人體吸收,真正有效吸收的成分并不多,。2,、這些食物多半脂肪含量較高,不適合經(jīng)常食用,。高熱量,、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,,加速老化,。如果能少吃這一類(lèi)食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機(jī)會(huì)及皮膚出現(xiàn)黑斑,、皺紋等的風(fēng)險(xiǎn),。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過(guò)早的發(fā)育和成熟,,不利于出生后的嬰兒成長(zhǎng)和發(fā)育,。
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。 方法 通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,,并重構(gòu)成膠原纖維,。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6 d,,通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2 d后,,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化,;礦化6 d后,,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,,經(jīng)礦化可形成與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉。布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,。
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導(dǎo),。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴(lài)性,。制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘。鄭州正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)
鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。鄭州正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格
膠原蛋白的功效與作用:可以預(yù)防心血管病。研究表明,,膠原蛋白可以降低血甘油三酯和膽固醇,,并可增高體內(nèi)某些缺乏的必需微量元素,從而使其維持在一個(gè)相對(duì)正常的范圍之內(nèi),,是一種理想的降血脂食品,。此外,膠原蛋白在協(xié)助機(jī)體排出鋁質(zhì),,減少鋁質(zhì)在體內(nèi)聚集方面也有獨(dú)特之處,。鋁對(duì)人體有害,研究表明,,日前逐漸增多的老年癡呆癥與鋁的攝入量有關(guān),,同時(shí)膠原蛋白有加速血紅蛋白和紅細(xì)胞生成的功效,它具有改善循環(huán),、對(duì),、缺血性腦病有利。鄭州正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格