糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中,。結果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,,顆粒狀,塊狀紅色為陽性,。無紅色顆粒為陰性_x000c_臨床意義1,、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,,糖原含量逐增加,,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀,。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應呈粗大的紫色顆粒或團塊,。正常紅系:陰性,。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,,以彌散性為主,;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒,、塊狀陽性反應對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性,。福建提供糖原染色試劑盒哪里買
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘,?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘,。(7)脫水、透明,、封蓋,。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色,。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,此時溶液應為無色,。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差福建口碑好的糖原染色試劑盒糖原的固定要及時,,而且標本要新鮮,。
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,,前一個染液浸染完成后,,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟,。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,,避免多余的水把染液稀釋了,,造成染色不佳。④在滴加染液時,,務必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,避免浪費試劑,。在染色時,,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出
網(wǎng)狀纖維的變化,,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少,、粗細緊密,、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,,尤其是在臨床病理診斷中,,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤,。而在HE染色標本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維,,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,,它多分布在結締組織與其它組織交界處,,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,,內(nèi)分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維,。糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變。
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色,;在正常血片中RBC不染色,;PLT染成深紅色;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒,;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒,;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色,;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關~擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,,保證實驗快速、有效的完成,。北京口碑好的糖原染色試劑盒報價
較大增強了染色效果,;性能穩(wěn)定,特異性強,;操作簡捷,,*需1h左右。福建提供糖原染色試劑盒哪里買
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標本各30例,,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL、甲醛10mL,。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,,冰醋酸100mL,95%酒精600mL,。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時,,過濾,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h福建提供糖原染色試劑盒哪里買