鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來源之一,。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2,、PECAM1,、vWF、CD34,、VE-cadherin,、GATA-2。②分化細(xì)胞表達內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin,、CD31,。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞,。為研究胞外基質(zhì)對誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號分子機制打下了基礎(chǔ),。鼠尾膠原醋酸溶解：不建議用過濾的方法無菌化。無錫石家莊鼠尾膠原

要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無齒鑷1把，200 ml燒杯1個,，培養(yǎng)皿1個,，帶蓋廣口瓶1個，離心管,、小瓶數(shù)個,，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10 min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴,，洗凈,，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴,，用止血鉗夾住尾巴較高,，折斷尾骨后拉出尾腱，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,，稱尾腱的重量,，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置48 小時，離心,。吸取其上清，分裝至小瓶,，4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。金華正規(guī)鼠尾膠原直銷價鼠尾膠原醋酸溶解：建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL，用1 mol/L 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5 mL自組裝液，室溫放置20 min,。予自組裝液自組裝24 h,。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。論鼠尾膠原能促進毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白,，女性朋友們眼睛都放光了，因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”,，層中70%都是膠原蛋白,，膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度！是讓我們皮膚變得有彈性的東西,。大部分只知道需要補充膠原蛋白,，但是卻不知道什么時候需要補充膠原蛋白，總認(rèn)為自己還年輕不需要補充,，其實這是錯誤的觀念,，膠原蛋白在女性20歲的時候就已經(jīng)開始流失了，含量逐漸下降,，25歲后進入流失的高峰期,，40歲時的含量不到80歲的一半，所以我們應(yīng)該20歲就開始補充膠原蛋白,，以保持皮膚的年輕狀態(tài),。用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。

實驗應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實驗中的促進毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細(xì)胞膜片鉗實驗中，自制的鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。南京天津鼠尾膠原

加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。無錫石家莊鼠尾膠原

鼠尾膠原實驗應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實驗中的促進毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實驗中,，自制的鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時,，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長時間（約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。無錫石家莊鼠尾膠原