鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細胞在體外可誘導分化為血管內(nèi)皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一,。目的:探討建立定向誘導人胚胎干細胞向血管內(nèi)皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基,。結果與結論:①在EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基誘導下,細胞逐步表達內(nèi)皮細胞特異性標記基因VEGFR-2,、PECAM1,、vWF、CD34,、VE-cadherin,、GATA-2。②分化細胞表達內(nèi)皮細胞特異性標記VE-cadherin,、CD31,。③分化細胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導,可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細胞,。為研究胞外基質(zhì)對誘導胚胎干細胞血管內(nèi)皮細胞分化的作用以及相關信號分子機制打下了基礎,。鼠尾膠原醋酸溶解：不建議用過濾的方法無菌化。無錫石家莊鼠尾膠原

要準備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把,，無齒鑷1把，200 ml燒杯1個,，培養(yǎng)皿1個,，帶蓋廣口瓶1個，離心管,、小瓶數(shù)個,，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經(jīng)44.48N10 min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴，洗凈,，置75%酒精浸泡消毒后,，手持尾巴，用止血鉗夾住尾巴較高,，折斷尾骨后拉出尾腱,，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中，稱尾腱的重量,，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液,，搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置48 小時,，離心。吸取其上清,，分裝至小瓶,，4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成。金華正規(guī)鼠尾膠原直銷價鼠尾膠原醋酸溶解：建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL，用1 mol/L 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5 mL自組裝液，室溫放置20 min,。予自組裝液自組裝24 h,。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白，女性朋友們眼睛都放光了,，因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”,，層中70%都是膠原蛋白，膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度,！是讓我們皮膚變得有彈性的東西,。大部分只知道需要補充膠原蛋白，但是卻不知道什么時候需要補充膠原蛋白,，總認為自己還年輕不需要補充,，其實這是錯誤的觀念，膠原蛋白在女性20歲的時候就已經(jīng)開始流失了,，含量逐漸下降,，25歲后進入流失的高峰期，40歲時的含量不到80歲的一半，所以我們應該20歲就開始補充膠原蛋白,，以保持皮膚的年輕狀態(tài),。用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。

實驗應用：探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細胞膜片鉗實驗中，自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用,。結果無鼠尾膠原時,，前庭毛細胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時,，前庭毛細胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用,。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。南京天津鼠尾膠原

加到相應的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。無錫石家莊鼠尾膠原

鼠尾膠原實驗應用：探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細胞膜片鉗實驗中,，自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用,。結果無鼠尾膠原時，前庭毛細胞懸浮于外液,，不宜封接；有鼠尾膠原時,，前庭毛細胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長時間（約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用,。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。無錫石家莊鼠尾膠原