無血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%,，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液,。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），較后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存,。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí),，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡,。）無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)：無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,。廣州無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家

通用細(xì)胞凍存液(無血清)的簡(jiǎn)介：隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展，除了原代培養(yǎng)之外,，人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要,。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,，從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋,，稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,，這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋以后，該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷,。通用細(xì)胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基,、DMSO 等組成，不含血清,，是一種經(jīng)典的無菌凍存液,。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系,、雜交瘤細(xì)胞等的凍存,。南昌無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件：推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

細(xì)胞凍存秘籍：程序1.凍存前檢查凍存前,，細(xì)胞應(yīng)處于指數(shù)生長(zhǎng)期,，確保細(xì)胞處于健康狀態(tài)。理想情況下,，應(yīng)在收獲細(xì)胞前24小時(shí)更換培養(yǎng)基,。建議對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行微生物污染物，特別是支原體的檢測(cè),，并通過適當(dāng)?shù)姆椒?，如STR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品,，那么建議在冷凍前1到2周不使用物品,，這樣如果出現(xiàn)污染，可以更容易地發(fā)現(xiàn),。2.收集細(xì)胞通常,，您可以使用常規(guī)細(xì)胞傳代的實(shí)驗(yàn)程序來收獲細(xì)胞。細(xì)胞收獲期間盡可能溫和操作,。本程序推薦的試劑量是針對(duì)為75平方厘米（T-75）培養(yǎng)瓶,；若使用其他培養(yǎng)容器，請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整所用試劑量,。A.使用無菌吸管,，取出并丟棄培養(yǎng)基。請(qǐng)妥善處置與細(xì)胞接觸的任何材料和溶液,。B.用5到10ml CMF-PBS沖洗細(xì)胞,，去除所有痕量的血清。C.加入3到5ml的胰酶（在CMF-PBS中）,，37℃孵育,。預(yù)熱酶溶液通常會(huì)縮短處理時(shí)間。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，4℃,，3~5 min），移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,，充分洗凈殘留凍存液,。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,。

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1.為保持細(xì)胞較大存活率,，一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低,。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為－1℃~12℃/分鐘,，當(dāng)溫度下降達(dá)－25℃時(shí)，下降速度可增至－5~－10℃/分鐘,，到－100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中,。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降入液氮中的速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,，太慢則促冰晶形成,。3.初次凍存者在下降凍存時(shí)，宜先用細(xì)木棒伸入罐中探測(cè)液面位置,，然后需用溫度計(jì)與凍存物并行的辦法,，以觀測(cè)下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系,，當(dāng)已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,，光按下降時(shí)間和下降距離便可獲理想凍存效果。無血清凍存液使用方法：儲(chǔ)存條件：2-8C保存,，年有效：-20C保存,，兩年有效。正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家便宜

無血清細(xì)胞凍存液：凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上,。廣州無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融,，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,，PH，電解質(zhì)等的改變,，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中，在培養(yǎng)器具,、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),，而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化,。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,，溫度達(dá)-196℃,，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。廣州無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家