在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,,它可提供營養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力,。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,,能使細胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動,。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,,CO2 氣體迅速逸出,,pH迅速升高,若加了HEPES,,此時可以維持 pH7.0 左右,。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。神經(jīng)細胞原代培養(yǎng)的過程中能用到,。常見的細菌類培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,、大腸桿菌培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基等等,。MSR培養(yǎng)基
細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,,硫酸鎂0.2g,,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,,1%結(jié)晶紫溶液1ml,。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,,攪拌使溶解后,,分裝,滅菌,,備用,。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,,磷酸氫二鉀0.05g,,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,,硫酸亞鐵0.001g,,瓊脂2g,水100ml,。先把淀粉放在燒杯里,,用5ml水調(diào)成糊狀后,倒入95ml水,,攪勻后加入其他藥品,,使它溶解。在燒杯外做好記號,,加熱到煮沸時加入瓊脂,,不停攪拌,,待瓊脂完全溶解后,補足失水,。調(diào)整pH值到7.2-7.4,,分裝后滅菌,備用,。乳酸鈉溶液某些培養(yǎng)基會在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化,,例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。
鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑,,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之,。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,含有葡萄糖及乳糖,,以酚紅作為指示劑,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,,加人檸檬酸鐵銨,,培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫;又如伊紅-美藍瓊脂,,含有乳糖(反應(yīng)底物),、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌,。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑,,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細菌,,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂,。
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,一類含有一般微生物生長繁殖所需基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。2.加富培養(yǎng)基,,一類在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血,、血清、動植物組織提取液制成的培養(yǎng)基,。用于培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物,。3.選擇培養(yǎng)基,一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué),、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,,普遍用于菌種篩選等領(lǐng)域。在有些情況下,,培養(yǎng)基還需要進行一些化學(xué)處理,。
選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,,尿素0.1%,,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,,磷酸氫二鈉0.05%,,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,,酵母膏0.05%,,孟加拉紅0.003%,pH4.5,。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,,氯化鈉0.02%,,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基類型和配方可以根據(jù)需要進行定制,,以滿足特定的實驗需求,。MSR培養(yǎng)基
雜質(zhì)會影響培養(yǎng)基的成分,因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌,。MSR培養(yǎng)基
天然培養(yǎng)基血清種類:目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等,。選擇用牛血清培養(yǎng)細胞的原因:來源充足,、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過長時間的應(yīng)用考驗人們對其有比較深入的理解,。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的,,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清,、胎牛血清,。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛,;小牛血清取自出生10-30天的小牛,。顯然,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,,因為胎牛還未接觸外界,,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少,。MSR培養(yǎng)基
上海瑞楚生物科技有限公司是一家從事培養(yǎng)基,,菌種,標準品,,酶研發(fā),、生產(chǎn)、銷售及售后的貿(mào)易型企業(yè),。公司坐落在寶安公路4997號2號樓5樓,,成立于2012-11-29。公司通過創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,,以客戶滿意為重要標準,。瑞楚生物目前推出了培養(yǎng)基,菌種,,標準品,酶等多款產(chǎn)品,,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個領(lǐng)域。我們堅持技術(shù)創(chuàng)新,,把握市場關(guān)鍵需求,,以重心技術(shù)能力,助力化工發(fā)展,。上海瑞楚生物科技有限公司每年將部分收入投入到培養(yǎng)基,,菌種,標準品,,酶產(chǎn)品開發(fā)工作中,,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用。公司在長期的生產(chǎn)運營中形成了一套完善的科技激勵政策,,以激勵在技術(shù)研發(fā),、產(chǎn)品改進等。培養(yǎng)基,菌種,,標準品,,酶產(chǎn)品滿足客戶多方面的使用要求,讓客戶買的放心,,用的稱心,,產(chǎn)品定位以經(jīng)濟實用為重心,公司真誠期待與您合作,,相信有了您的支持我們會以昂揚的姿態(tài)不斷前進,、進步。