數(shù)字PCR的引物和探針設(shè)計規(guī)則同熒光定量PCR是類似的,，具體規(guī)則如下：1,、查找和選擇目標(biāo)序列設(shè)計引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列,。找到基因保守區(qū)域：基因的保守區(qū)域是指來自同一屬/種/亞型的、在某個基因上堿基序列差別很小或沒有差別的區(qū)域,。根據(jù)需要,，使用ClustalX或ClustalW等軟件對齊屬于同一屬/種/亞型的基因的一組序列，在對齊序列的保守區(qū)域設(shè)計引物,，并確保引物結(jié)合位點處的保守序列與其它非待檢測的屬/種/亞型的堿基序列具有較大的差異,。擴(kuò)增產(chǎn)物長度（AmpliconLength）：可在75-200bp之間（產(chǎn)物長度=下游引物位置-上游引物位置+1）,。數(shù)字PCR是通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,，分配到不同的反應(yīng)單元，每個單元至少包含一個拷貝的目標(biāo)分子 。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

PCR已成為分子診斷領(lǐng)域重要的技術(shù)手段之一,，占據(jù)分子診斷市場的半壁江山,。數(shù)字PCR是一代PCR技術(shù)，也是當(dāng)前靈敏度和定量精度比較高的分子檢測技術(shù),。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對較高,，檢測靶點數(shù)少（一般≤6靶點/反應(yīng)），阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應(yīng)用,，提高數(shù)字PCR的多重檢測能力迫在眉睫,。基于熒光通道數(shù)的增加和基于探針濃度梯度增加,，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù),，然而只能達(dá)到"線性"增加的目的?；谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測技術(shù)雖然光'f明顯增加多重能力,，但由于無法避免交叉反應(yīng)現(xiàn)象，不能確保獲得位點特異性的分簇,，因此穩(wěn)定性不足,、靈敏度較差，難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求,。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨特適用的熒光編碼技術(shù)可以實現(xiàn)“指數(shù)”級的多重檢測,，顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，覆蓋臨床應(yīng)用多場景需求,。深圳一體化數(shù)字PCR市場前景在使用dPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測時,，通常直接參照qPCR的方法。

由于現(xiàn)有的商業(yè)化數(shù)字PCR設(shè)備在物理上只設(shè)置了2個檢測通道,，所以存在一個明顯的短板：不能同時進(jìn)行多個位點的檢測,。在樣品多位點的檢測中，就需要更多的起始樣品,，但臨床上組織的樣品非常有限,。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現(xiàn)多重檢測。為了考察利用數(shù)字PCR實現(xiàn)多重檢測的可能性,，英國TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細(xì)胞肺相關(guān)的KRAS基因為檢測對象,，在Bio-Rad的數(shù)字PCR系統(tǒng)上通過3個三重ddPCR檢測體系來實現(xiàn)9個KRAS突變位點的檢測。

對于檢測需要高靈敏度以及技術(shù)確認(rèn)的情況下,，數(shù)字PCR技術(shù)也可以發(fā)揮重要作用,。技術(shù)數(shù)據(jù)表明，數(shù)字PCR技術(shù)對的比較低檢測下限可到2copies/ml,，比qPCR靈敏度提升了100倍,。經(jīng)測試,，數(shù)字PCR在檢測和診斷的某些方面優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn)qPCR，尤其是在低病毒載量樣本中,，相比起qPCR,，數(shù)字PCR特異性、靈敏度,、重現(xiàn)性和檢測限受影響更小,。因此，未來預(yù)計數(shù)字PCR技術(shù)也將在類疾病中得到更加廣的應(yīng)用,。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣,，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測以外，也可運用于基因擴(kuò)增的檢測,。通過數(shù)字PCR技術(shù)可建立多重?zé)晒怏w系,，用于同時檢測比如非小細(xì)胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴(kuò)增。有研究報道,，使用數(shù)字PCR技術(shù)對436例非小細(xì)胞肺樣品進(jìn)行檢測,，并挑選樣本驗證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測一致性。結(jié)果表明,，該數(shù)字PCR技術(shù)在保證了基因擴(kuò)增檢測準(zhǔn)確性的同時,，還節(jié)約了檢測時間。dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾,，適合單一,、雙重及多重轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究，一次可識別不同的轉(zhuǎn)基因區(qū)域,。

基于數(shù)字PCR技術(shù)平臺,，塔歌生物成功地開發(fā)了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無創(chuàng)產(chǎn)前篩查試劑盒（數(shù)字PCR-NIPT），并已完成數(shù)百例臨床樣本驗證,。數(shù)字PCR-NIPT的陽性檢出率和NGS相似,，且成本接近血清學(xué)，可以在上述應(yīng)急策略中取代血清學(xué)作為靈敏度和特異性更高的初篩方法,，以有效提高陽性檢出率,，降低需要復(fù)篩的假陽性樣本數(shù)和節(jié)省總的篩查成本。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊,，可用于病原微生物檢測,、基因檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查,、測序結(jié)果驗證等領(lǐng)域,。但目前，大多數(shù)醫(yī)院采購的數(shù)字PCR儀器是用于科研層面,，在臨床應(yīng)用上仍處于起步階段,，未得到普遍應(yīng)用,。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測以外,，也可運用于基因擴(kuò)增的檢測。珠三角全自動多重數(shù)字PCR油滴制造

國產(chǎn)dPCR企業(yè)在上述應(yīng)用領(lǐng)域不斷與伯樂,、賽默飛,、羅氏、凱杰,、因美納等頭部企業(yè)展開競爭,，搶占市場份額。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（digitalpolymerchainreaction,，dPCR）技術(shù)因具有高靈敏度,、受基質(zhì)干擾少等優(yōu)勢而被廣用于轉(zhuǎn)基因食品檢測。本研究綜述了數(shù)字PCR技術(shù)的原理,、系統(tǒng)各部件的優(yōu)劣勢,，梳理了數(shù)字PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因檢測與溯源技術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）方面的進(jìn)展和發(fā)展趨勢，以期為轉(zhuǎn)基因食品檢測領(lǐng)域提供參考依據(jù),。dPCR的擴(kuò)增過程大致上可以分為3步：樣品的分散,、樣品的熱循環(huán)擴(kuò)增和樣品的檢測。對于數(shù)字PCR儀器系統(tǒng),，各個部件之間仍然有較大的改進(jìn)空間,，要發(fā)揮部件之間的協(xié)同作用是很重要的，而且有持續(xù)研究的價值,。表1中總結(jié)了部分常見的數(shù)字PCR系統(tǒng)的類型,，以及相對在硬件、便攜性,、性價比和自動化程度上的比較,。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

雙螺旋科學(xué)儀器，2015-04-17正式啟動,，成立了數(shù)字PCR,，純水機(jī)，病理切片機(jī),，倍性分析儀等幾大市場布局,，應(yīng)對行業(yè)變化，順應(yīng)市場趨勢發(fā)展,，在創(chuàng)新中尋求突破,，進(jìn)而提升臻準(zhǔn),美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia的市場競爭力，把握市場機(jī)遇,，推動精細(xì)化學(xué)品產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步,。業(yè)務(wù)涵蓋了數(shù)字PCR,，純水機(jī)，病理切片機(jī),，倍性分析儀等諸多領(lǐng)域,，尤其數(shù)字PCR，純水機(jī),，病理切片機(jī),，倍性分析儀中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢，完成了一大批具特色和時代特征的精細(xì)化學(xué)品項目,；同時在設(shè)計原創(chuàng),、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動行業(yè)發(fā)展,。我們在發(fā)展業(yè)務(wù)的同時,，進(jìn)一步推動了品牌價值完善。隨著業(yè)務(wù)能力的增長,，以及品牌價值的提升,，也逐漸形成精細(xì)化學(xué)品綜合一體化能力。公司坐落于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號617房,，業(yè)務(wù)覆蓋于全國多個省市和地區(qū),。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收，進(jìn)一步為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì),、社會協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻(xiàn),。