在神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究領(lǐng)域,,斑馬魚也發(fā)揮著重要作用,。斑馬魚的神經(jīng)系統(tǒng)相對(duì)簡(jiǎn)單,,但包含了脊椎動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)的基本組成部分,。通過構(gòu)建神經(jīng)退行性疾病模型,,如阿爾茨海默病、帕金森病模型,,觀察斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元的損傷,、神經(jīng)遞質(zhì)的變化以及行為學(xué)異常等表現(xiàn),有助于揭示這些疾病的病理過程,。例如,,在阿爾茨海默病模型中,斑馬魚會(huì)出現(xiàn)記憶力減退,、學(xué)習(xí)能力下降等行為變化,,同時(shí)大腦中會(huì)出現(xiàn)類似人類患者的淀粉樣蛋白沉積,這為研究該疾病的病因和尋找治療方法提供了有力的工具,。高溫環(huán)境可能導(dǎo)致斑馬魚的胚胎發(fā)育畸形率增加,。斑馬魚課題研究
斑馬魚 cdx 實(shí)驗(yàn)為解析基因功能提供了一條行之有效的途徑。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面,,研究人員可以利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚技術(shù),,將帶有特定標(biāo)記的 cdx 基因構(gòu)建體導(dǎo)入斑馬魚胚胎中,從而在活的狀態(tài)下追蹤 cdx 基因的表達(dá)模式和動(dòng)態(tài)變化,。同時(shí),,結(jié)合基因編輯工具,如 CRISPR/Cas9 系統(tǒng),,創(chuàng)建 cdx 基因突變體斑馬魚品系,,觀察其在多個(gè)發(fā)育階段與野生型斑馬魚的差異。從細(xì)胞層面來看,,通過免疫熒光染色等技術(shù),,可以檢測(cè)與 cdx 基因相關(guān)的細(xì)胞信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白的分布和活性變化,進(jìn)而多面地解析 cdx 基因在細(xì)胞增殖,、分化以及組織organ形成過程中的功能,,為理解相關(guān)基因在脊椎動(dòng)物發(fā)育中的保守性和特異性奠定基礎(chǔ)。斑馬魚熒光試劑出售斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,卻有規(guī)律跳動(dòng),,是心血管研究的好對(duì)象,。
利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸(Morpholino)特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切,從而降低基因的表達(dá)水平,,用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究,;利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時(shí)破壞基因的編碼序列,從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達(dá)水平來研究基因的功能,,用于各個(gè)階段的基因功能研究,。破壞該基因正常表達(dá),主要用于在動(dòng)物模型中研究基因的功能等,。定點(diǎn)插入外源核酸片段,,用于標(biāo)記基因的精細(xì)表達(dá)模式、破壞該基因正常表達(dá),、構(gòu)建點(diǎn)突變,、實(shí)現(xiàn)時(shí)間空間上控制基因表達(dá)等。
新藥研發(fā)恰似在浩渺大海撈針,,不僅耗時(shí)費(fèi)力,,還需巨額資金投入。斑馬魚Cdx模型恰似一臺(tái)高效引擎,,為藥物篩選注入強(qiáng)勁動(dòng)力,。斑馬魚繁殖能力驚人,一對(duì)成年斑馬魚一次產(chǎn)卵可達(dá)上百枚,;加之胚胎透明,,在顯微鏡下內(nèi)部organ、細(xì)胞動(dòng)態(tài)一目了然,,為藥物作用效果可視化觀察提供便利,。基于Cdx模型開展藥物篩選時(shí),,科研人員將候選藥物加入斑馬魚養(yǎng)殖水體,,藥物迅速滲透進(jìn)入胚胎或幼魚體內(nèi)。若目標(biāo)藥物旨在矯正因Cdx基因異常引發(fā)的脊柱畸形,,通過模型便能直觀看到幼魚脊柱在藥物作用下逐步恢復(fù)正常形態(tài),;若是醫(yī)療腸道疾病藥物,可清晰觀察腸道蠕動(dòng)節(jié)律重歸平穩(wěn),、絨毛結(jié)構(gòu)趨向完整,。斑馬魚在繁殖時(shí),雄魚會(huì)追逐雌魚,,完成受精過程。
新藥研發(fā)耗時(shí)漫長、成本高昂,,斑馬魚Cdx高通量藥物篩選技術(shù)打破僵局,,為制藥產(chǎn)業(yè)注入強(qiáng)勁動(dòng)力。斑馬魚繁殖迅速,、單次產(chǎn)卵量多,,加之胚胎及幼魚體型微小,養(yǎng)殖占地少,、成本低,,天然適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)?;贑dx技術(shù)搭建藥物篩選平臺(tái),,關(guān)鍵在于利用斑馬魚Cdx基因異常引發(fā)的疾病模型,如脊柱畸形,、腸道功能紊亂模型,。將海量候選藥物以溶液形式加入斑馬魚養(yǎng)殖水體,藥物經(jīng)皮膚,、鰓快速吸收進(jìn)入體內(nèi),。若某藥物旨在矯正因Cdx基因缺陷導(dǎo)致的脊柱彎曲,篩選過程中可實(shí)時(shí)觀察幼魚脊柱恢復(fù)情況,;醫(yī)療腸道疾病藥物,,則聚焦腸道蠕動(dòng)、絨毛修復(fù)指標(biāo),。其胚胎透明,,在顯微鏡下可清晰觀察發(fā)育過程,助于研究organ形成,。斑馬魚模型基因突變
斑馬魚的脂肪組織可儲(chǔ)存能量,,在食物短缺時(shí)供能。斑馬魚課題研究
斑馬魚實(shí)驗(yàn)?zāi)P驮谒幬镅邪l(fā)過程中具有明顯的優(yōu)勢(shì),,為藥物篩選和評(píng)價(jià)提供了高效,、快速和經(jīng)濟(jì)的平臺(tái)。其繁殖速度快,、子代數(shù)量多的特點(diǎn)使得能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量化合物進(jìn)行高通量篩選,。在藥物篩選實(shí)驗(yàn)中,將斑馬魚胚胎或幼魚暴露于不同的藥物或化合物中,,通過觀察斑馬魚的生長發(fā)育,、生理功能、行為變化以及疾病模型中的表型改善情況等指標(biāo),,來評(píng)估藥物的有效性和安全性,。例如,,在抗癲癇藥物研發(fā)中,可以利用斑馬魚癲癇模型,,觀察候選藥物對(duì)斑馬魚癲癇發(fā)作的抑制作用,。如果一種藥物能夠明顯減少斑馬魚的癲癇發(fā)作頻率和強(qiáng)度,并且對(duì)斑馬魚的正常生長發(fā)育沒有明顯的不良影響,,那么該藥物就具有進(jìn)一步開發(fā)的潛力,。斑馬魚課題研究