斑馬魚通體透明,,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡,、實時洞悉其功能動態(tài),熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺,。通過基因融合手段,,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP、紅色熒光蛋白RFP)與Cdx基因相連,,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎,。發(fā)育進(jìn)程中,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,,在熒光顯微鏡下熠熠生輝,。科研人員借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,例如在中胚層,、內(nèi)胚層分化起始階段,,熒光標(biāo)記的Cdx陽性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移、聚集規(guī)律,,宛如夜空中閃爍移動的星群,,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線。斑馬魚的消化系統(tǒng)包括口腔,、食道,、胃和腸道等organ。斑馬魚基因編輯科研服務(wù)cro
在生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的當(dāng)下,,斑馬魚作為一種極為重要的模式生物,,為眾多生物學(xué)研究領(lǐng)域開辟了嶄新道路。而隱匿于斑馬魚體內(nèi)的 Cdx 基因,,更是憑借其獨(dú)特的功能與多樣的作用機(jī)制,,吸引著全球科研工作者的目光,成為解析胚胎發(fā)育,、疾病發(fā)生以及環(huán)境適應(yīng)機(jī)制的關(guān)鍵研究對象,。斑馬魚胚胎發(fā)育是一場精妙絕倫、高度有序的細(xì)胞 “變奏曲”,,Cdx 基因則穩(wěn)坐 “指揮席”,,把控全程節(jié)奏。Cdx 基因家族在斑馬魚基因組中并非孤立存在,,其多個成員各司其職又協(xié)同合作,,自受精卵開啟分裂征程的那一刻起,便積極投身到這場宏大的生命構(gòu)建工程當(dāng)中,。轉(zhuǎn)基因斑馬魚 費(fèi)用斑馬魚的性別可通過外觀特征和解剖結(jié)構(gòu)初步判斷,。
斑馬魚 cdx 實驗為解析基因功能提供了一條行之有效的途徑,。在實驗設(shè)計方面,,研究人員可以利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚技術(shù),將帶有特定標(biāo)記的 cdx 基因構(gòu)建體導(dǎo)入斑馬魚胚胎中,,從而在活的狀態(tài)下追蹤 cdx 基因的表達(dá)模式和動態(tài)變化,。同時,結(jié)合基因編輯工具,,如 CRISPR/Cas9 系統(tǒng),,創(chuàng)建 cdx 基因突變體斑馬魚品系,觀察其在多個發(fā)育階段與野生型斑馬魚的差異,。從細(xì)胞層面來看,,通過免疫熒光染色等技術(shù),可以檢測與 cdx 基因相關(guān)的細(xì)胞信號通路中關(guān)鍵蛋白的分布和活性變化,進(jìn)而多面地解析 cdx 基因在細(xì)胞增殖,、分化以及組織organ形成過程中的功能,,為理解相關(guān)基因在脊椎動物發(fā)育中的保守性和特異性奠定基礎(chǔ)。
環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務(wù),,利用CRISPR/Cas9技術(shù)快速在斑馬魚模型中驗證人類遺傳病,、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等,,主要研究領(lǐng)域為嬰幼兒發(fā)育畸形,、罕見病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病,、心腦的血管疾病,、血液病、生殖缺陷等,。相較于哺乳動物基因編輯的試驗周期長(一般1年以上),、表型不直觀(一般需染色)、研究成功率低等缺點,,斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢有:1.實驗周期快,,快可在2周內(nèi)進(jìn)行疾病相關(guān)的表型觀察(F0代高效瞬時敲降),3個月內(nèi)完成穩(wěn)定品系構(gòu)建(雜合子F1代3個月,,純合子F2代6個月,,子代數(shù)量多);2. 直觀,、多維度地活的動態(tài)觀察(可對特定organ組織細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記,,利用透明斑馬魚活的觀察和成像,哺乳動物上很難實現(xiàn)),;3. 研究成功率高(與哺乳動物相比較,,斑馬魚基因編輯效率高,樣本數(shù)量多,,可同時測試多個相關(guān)基因,,比較大化保證研究的成功率)。斑馬魚的行為學(xué)研究可揭示其對環(huán)境變化的適應(yīng)策略,。
儀器設(shè)備,,是實驗室功能的關(guān)鍵單元。在斑馬魚實驗室設(shè)備領(lǐng)域,,環(huán)特自主開發(fā)了10余類具備帶動競爭力的智能化設(shè)備,。比如斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)、斑馬魚獨(dú)特成像系統(tǒng),、斑馬魚3D行為分析系統(tǒng),、斑馬魚2D行為分析系統(tǒng),、斑馬魚強(qiáng)迫游泳試驗儀、斑馬魚胚胎分裝系統(tǒng),、斑馬魚培養(yǎng)箱,、斑馬魚臭氧干燥箱和斑馬魚高通量工作站等獨(dú)特儀器設(shè)備,大幅提升實驗室運(yùn)營效率,,加速技術(shù)成果產(chǎn)出,。環(huán)特實驗室已通過CNAS、CMA和AAALAC認(rèn)證,,擁有實驗動物生產(chǎn)與使用許可證,,自有8500m2實驗室。環(huán)特實驗室在技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用領(lǐng)域,,已牽頭起草發(fā)布團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)17項,,申請發(fā)明專利66項,自主開發(fā)斑馬魚模型170多種,,發(fā)表SCI及核心期刊論文220多篇,,已有7個新藥項目成功將環(huán)特斑馬魚實驗數(shù)據(jù)用于NMPA(國家藥監(jiān)局)的臨床試驗申報,累計完成項目8000多個,,長期合作客戶800多家,。研究斑馬魚的腦結(jié)構(gòu)有助于理解認(rèn)知和學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)。斑馬魚實驗文獻(xiàn)代做
其體內(nèi)的色素細(xì)胞可使身體呈現(xiàn)出黑白相間的條紋,。斑馬魚基因編輯科研服務(wù)cro
斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測:(1)將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h,;(2)質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常;(3)劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡,?!窦毙远拘院桶衞rgan毒性檢測:(1)更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險的深入評價和風(fēng)險物質(zhì)的評估;(2)可以識別毒性風(fēng)險作用在哪種organ上,;(3)刺激性和致敏性風(fēng)險篩查,。●慢性毒性檢測:(1)將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,,獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚,;(2)轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光?!窨焖贆z測:(1)開發(fā)“小硬件+大后臺”現(xiàn)場快檢體系,;(2)基于斑馬魚的行為學(xué)對急性食物中毒風(fēng)險進(jìn)行控制,;(3)檢測時間應(yīng)控制在1小時,,適用于餐飲單位。斑馬魚基因編輯科研服務(wù)cro