斑馬魚(yú)通體透明,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡,、實(shí)時(shí)洞悉其功能動(dòng)態(tài),熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺,。通過(guò)基因融合手段,,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP、紅色熒光蛋白R(shí)FP)與Cdx基因相連,,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚(yú)胚胎,。發(fā)育進(jìn)程中,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,,在熒光顯微鏡下熠熠生輝,。科研人員借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,,例如在中胚層,、內(nèi)胚層分化起始階段,熒光標(biāo)記的Cdx陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移,、聚集規(guī)律,,宛如夜空中閃爍移動(dòng)的星群,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線,。斑馬魚(yú)的消化系統(tǒng)包括口腔,、食道、胃和腸道等organ,。斑馬魚(yú)基因編輯科研服務(wù)cro
在生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的當(dāng)下,,斑馬魚(yú)作為一種極為重要的模式生物,為眾多生物學(xué)研究領(lǐng)域開(kāi)辟了嶄新道路,。而隱匿于斑馬魚(yú)體內(nèi)的 Cdx 基因,,更是憑借其獨(dú)特的功能與多樣的作用機(jī)制,吸引著全球科研工作者的目光,,成為解析胚胎發(fā)育,、疾病發(fā)生以及環(huán)境適應(yīng)機(jī)制的關(guān)鍵研究對(duì)象,。斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育是一場(chǎng)精妙絕倫、高度有序的細(xì)胞 “變奏曲”,,Cdx 基因則穩(wěn)坐 “指揮席”,,把控全程節(jié)奏。Cdx 基因家族在斑馬魚(yú)基因組中并非孤立存在,,其多個(gè)成員各司其職又協(xié)同合作,,自受精卵開(kāi)啟分裂征程的那一刻起,便積極投身到這場(chǎng)宏大的生命構(gòu)建工程當(dāng)中,。轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú) 費(fèi)用斑馬魚(yú)的性別可通過(guò)外觀特征和解剖結(jié)構(gòu)初步判斷,。
斑馬魚(yú) cdx 實(shí)驗(yàn)為解析基因功能提供了一條行之有效的途徑。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面,,研究人員可以利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)技術(shù),,將帶有特定標(biāo)記的 cdx 基因構(gòu)建體導(dǎo)入斑馬魚(yú)胚胎中,從而在活的狀態(tài)下追蹤 cdx 基因的表達(dá)模式和動(dòng)態(tài)變化,。同時(shí),,結(jié)合基因編輯工具,如 CRISPR/Cas9 系統(tǒng),,創(chuàng)建 cdx 基因突變體斑馬魚(yú)品系,,觀察其在多個(gè)發(fā)育階段與野生型斑馬魚(yú)的差異。從細(xì)胞層面來(lái)看,,通過(guò)免疫熒光染色等技術(shù),,可以檢測(cè)與 cdx 基因相關(guān)的細(xì)胞信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白的分布和活性變化,進(jìn)而多面地解析 cdx 基因在細(xì)胞增殖,、分化以及組織organ形成過(guò)程中的功能,,為理解相關(guān)基因在脊椎動(dòng)物發(fā)育中的保守性和特異性奠定基礎(chǔ)。
環(huán)特生物提供基于斑馬魚(yú)模型的基因編輯服務(wù),,利用CRISPR/Cas9技術(shù)快速在斑馬魚(yú)模型中驗(yàn)證人類遺傳病,、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等,,主要研究領(lǐng)域?yàn)閶胗變喊l(fā)育畸形,、罕見(jiàn)病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病,、心腦的血管疾病,、血液病、生殖缺陷等,。相較于哺乳動(dòng)物基因編輯的試驗(yàn)周期長(zhǎng)(一般1年以上),、表型不直觀(一般需染色)、研究成功率低等缺點(diǎn),,斑馬魚(yú)基因編輯模型主要優(yōu)勢(shì)有:1.實(shí)驗(yàn)周期快,,快可在2周內(nèi)進(jìn)行疾病相關(guān)的表型觀察(F0代高效瞬時(shí)敲降),,3個(gè)月內(nèi)完成穩(wěn)定品系構(gòu)建(雜合子F1代3個(gè)月,純合子F2代6個(gè)月,,子代數(shù)量多),;2. 直觀、多維度地活的動(dòng)態(tài)觀察(可對(duì)特定organ組織細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記,,利用透明斑馬魚(yú)活的觀察和成像,哺乳動(dòng)物上很難實(shí)現(xiàn)),;3. 研究成功率高(與哺乳動(dòng)物相比較,,斑馬魚(yú)基因編輯效率高,樣本數(shù)量多,,可同時(shí)測(cè)試多個(gè)相關(guān)基因,,比較大化保證研究的成功率)。斑馬魚(yú)的行為學(xué)研究可揭示其對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)策略,。
儀器設(shè)備,,是實(shí)驗(yàn)室功能的關(guān)鍵單元。在斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備領(lǐng)域,,環(huán)特自主開(kāi)發(fā)了10余類具備帶動(dòng)競(jìng)爭(zhēng)力的智能化設(shè)備,。比如斑馬魚(yú)養(yǎng)殖系統(tǒng)、斑馬魚(yú)獨(dú)特成像系統(tǒng),、斑馬魚(yú)3D行為分析系統(tǒng),、斑馬魚(yú)2D行為分析系統(tǒng)、斑馬魚(yú)強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)儀,、斑馬魚(yú)胚胎分裝系統(tǒng),、斑馬魚(yú)培養(yǎng)箱、斑馬魚(yú)臭氧干燥箱和斑馬魚(yú)高通量工作站等獨(dú)特儀器設(shè)備,,大幅提升實(shí)驗(yàn)室運(yùn)營(yíng)效率,,加速技術(shù)成果產(chǎn)出。環(huán)特實(shí)驗(yàn)室已通過(guò)CNAS,、CMA和AAALAC認(rèn)證,,擁有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)與使用許可證,自有8500m2實(shí)驗(yàn)室,。環(huán)特實(shí)驗(yàn)室在技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用領(lǐng)域,,已牽頭起草發(fā)布團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)17項(xiàng),申請(qǐng)發(fā)明專利66項(xiàng),,自主開(kāi)發(fā)斑馬魚(yú)模型170多種,,發(fā)表SCI及核心期刊論文220多篇,已有7個(gè)新藥項(xiàng)目成功將環(huán)特斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用于NMPA(國(guó)家藥監(jiān)局)的臨床試驗(yàn)申報(bào),,累計(jì)完成項(xiàng)目8000多個(gè),,長(zhǎng)期合作客戶800多家,。研究斑馬魚(yú)的腦結(jié)構(gòu)有助于理解認(rèn)知和學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)。斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)代做
其體內(nèi)的色素細(xì)胞可使身體呈現(xiàn)出黑白相間的條紋,。斑馬魚(yú)基因編輯科研服務(wù)cro
斑馬魚(yú)安全評(píng)價(jià)體系●胚胎毒性檢測(cè):(1)將新受精的斑馬魚(yú)胚胎在受試物前處理液中暴露24h,;(2)質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚(yú)胚胎生長(zhǎng)發(fā)育正常;(3)劣質(zhì)產(chǎn)品會(huì)誘發(fā)斑馬魚(yú)胚胎毒性甚至死亡,?!窦毙远拘院桶衞rgan毒性檢測(cè):(1)更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險(xiǎn)的深入評(píng)價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的評(píng)估;(2)可以識(shí)別毒性風(fēng)險(xiǎn)作用在哪種organ上,;(3)刺激性和致敏性風(fēng)險(xiǎn)篩查,。●慢性毒性檢測(cè):(1)將綠色熒光蛋白(諾貝爾獎(jiǎng)技術(shù))與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合,,獲得了能夠檢測(cè)類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú),;(2)轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)可以識(shí)別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光?!窨焖贆z測(cè):(1)開(kāi)發(fā)“小硬件+大后臺(tái)”現(xiàn)場(chǎng)快檢體系,;(2)基于斑馬魚(yú)的行為學(xué)對(duì)急性食物中毒風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行控制;(3)檢測(cè)時(shí)間應(yīng)控制在1小時(shí),,適用于餐飲單位,。斑馬魚(yú)基因編輯科研服務(wù)cro